叶酸的分析方法

Method of Analysis for Folic Acid

2008年6月15日Ankur Choudhary (noreply@blogger.com)AI 专业翻译

描述;说明

黄色至黄橙色结晶性粉末;无味或几乎无味。

2. 溶解度

几乎不溶于冷水及大多数有机溶剂;微溶于沸水;可溶于稀酸和碱性溶液中。

3. 识别;鉴定

A. 通过紫外线(UV)处理

需要试剂。
0.1M氢氧化钠溶液
样品溶液:将100毫克样品溶解在0.1 M氢氧化钠溶液中。然后,将上述1毫升溶液进一步用0.1 M氢氧化钠溶液稀释至100毫升。
程序:在230纳米至380纳米波长范围内的光吸收值
在大约256纳米、283纳米和365纳米处有三个最大吸收值;在256纳米处的吸光度约为0.59,在283纳米处约为0.575,在365纳米处约为0.206。

B. 采用薄层色谱法

固定相:硅胶G
流动相:60体积的乙醇(95%),20体积的强氨溶液,以及20体积的1-丙醇。
分别取两种溶液,每种溶液各2毫升进行使用。
稀释剂:9体积的甲醇和2体积的强氨溶液。
样品溶液:将50毫克的样品溶解在100毫升的稀释液中。
标准溶液:将50毫克的叶酸(Folic acid WRS)溶解在100毫升的稀释剂中。
移除板后,将其置于空气中晾干,并在紫外光(365 nm)下进行检测。样品溶液所得色谱图中的主峰应与标准溶液所得色谱图中的主峰一致。

4. 特异旋光度

限制:大约 + 20°
**操作步骤:** 将1.0克样品溶解在100毫升0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液中,然后使用经过校准的偏振光仪进行检测。

5. 游离胺

在检测中测得的未还原溶液的吸光度不得超过还原溶液吸光度的六分之一。

6. 硫酸盐灰分

限制:不得超过0.2%
**操作步骤:** 将硅 crucible(硅坩埚)加热至发红状态,持续10分钟;随后在干燥器中冷却并称重。称取约1克待检测的准确称量的物质放入硅坩埚中,用硫酸湿润后轻轻点燃;再次用硫酸湿润后,在约800°C的温度下点燃;冷却后重新称重,继续点燃15分钟。重复此过程,直到连续两次称量的结果相差不超过0.5毫克为止。
计算;核算
                                     W3 – W1
% 硫酸盐灰分 = --------------------- × 100
                                     W2 – W1
“Where:”
W1 = 空铂坩埚的重量。
W2 = 坩埚重量 + 样品重量。
W3 = 坩埚重量 + 灰分重量。(燃烧后所得)

7. 水

限制:浓度范围在5.0%至8.5%(重量/体积比)之间。
需要试剂。
无水甲醇(AR级)
KF试剂:无吡啶的单组分溶液
**操作步骤:** 在滴定容器中取约40毫升无水甲醇,用KF试剂进行中和,然后分别测定三次KF试剂的浓度(单位为mg H2O/5毫升),并记录平均值。
将大约150毫克的样品准确加入滴定容器中。使用KF试剂进行滴定,直至达到电位滴定的终点。记录卡尔·费休滴定仪测得的水分含量百分比。重复三次实验以测定样品的水分含量,并取平均值。

8. 测定;分析;含量测定

限度:以无水物计,不得低于95.0%,不得超过102%。
需要试剂。
0.1M氢氧化钠
2.0M盐酸
锌粉
0.1%(重量/体积)亚硝酸钠溶液
0.5%(重量/体积)氨基磺酸铵
1% w/v N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐溶液
**解决方案(A):** 将约50毫克的样品准确溶解在100毫升的容量瓶中,使用0.1M的氢氧化钠溶液进行溶解,然后用0.1M的氢氧化钠溶液稀释至50毫升。
**解决方案(B):** 将约50毫克的叶酸WRS准确溶解在100毫升的容量瓶中,使用0.1M氢氧化钠溶液进行溶解,然后用0.1M氢氧化钠溶液稀释至50毫升。
样品制备:向3.0毫升溶液(A)中加入20毫升2.0摩尔的盐酸,然后用蒸馏水稀释至100毫升。向50毫升的样品制备液中加入0.5克锌粉,置于避光条件下振荡20分钟后过滤。将10毫升滤液用蒸馏水稀释至25毫升。
标准品的制备方法如下: 向3.0毫升的溶液(B)中加入20毫升2.0摩尔的盐酸,然后用蒸馏水稀释至100毫升。 向50毫升的标准品溶液中加入0.5克锌粉,置于避光条件下振荡20分钟后过滤。 将过滤后的10毫升溶液用蒸馏水稀释至25毫升。
空白样品制备:用25毫升水代替样品进行操作。
未稀释溶液:取30毫升溶液(A)和溶液(B),加入20毫升2摩尔/升的盐酸以及适量的水,配制成100毫升的溶液并混合均匀。然后分别向10毫升的每种溶液中再加入15毫升的水。
**操作步骤:** 向样品、标准品、空白对照品以及未还原的溶液中各加入5毫升2摩尔/升的盐酸和5毫升0.1%(重量/体积)亚硝酸钠溶液,混合后静置2分钟。接着加入5毫升0.5%(重量/体积)氨基磺酸铵溶液,混合后再次静置2分钟。随后加入5毫升1%(重量/体积)N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐溶液,混合后静置10分钟。最后加入足够的水使总体积达到50毫升,然后在约550纳米波长处测量吸光度。
从还原溶液的吸光度中减去未还原溶液吸光度的十分之一,然后用得到的结果计算出以无水状态存在的C19H19N7O6的量。
计算;核算
叶酸的含量百分比 =
         样品:标准品的吸光度(Abs)× 重量(Wt)× 5×50×50×纯度(Purity)× 100
= ------------------------------------------------------------------------------------
          标准面积 × 0.50 × 0.50 × 样品重量 × 5 × (100 - % LOD)


📌 本文由 AI 翻译自 pharmaguideline.com,仅供内部参考查看英文原文