1.0 目标
制定程序的目的是为了对无菌区域的人员进行监督和管理。2.0 范围
该程序适用于所有无菌区域的人员监控。3.0 责任
微生物学家4.0 责任制
质量保证与质量控制负责人5.0 程序
微生物人员的监测是按照以下方法进行的：1. 指尖点涂法。
2. 使用两种方法对不同部位进行工作服擦拭消毒。
A. 表面拭子法
B. 接触平板法
5.1 指尖点涂法
5.1.1 按照要求制备 SCDA 培养基。 培养基制备的标准操作规程（SOP）.5.1.2 用无菌方法将约15–20毫升冷却至40°C的无菌SCDA琼脂液倒入无菌的90毫米培养皿中。
5.1.3 在层流空气（LAF）条件下让培养板固化；固化完成后，用标签标明所有培养板的培养基名称、制备批次号以及制备日期。
5.1.4 将平板倒置并孵育以进行预孵育，检查平板上是否有任何……（Invert and incubate the plates for preincubation to check for any……） 污染；杂质 如果出现污染，应按照标准操作规程（SOP）的要求丢弃这些培养板。 微生物废物的销毁 通过高压灭菌法处理。
5.1.5 将容器从无菌区域的传递箱中转移出来，人员必须通过气锁进入（人员入口），具体操作需遵循《人员进入》的标准操作规程（SOP）。 更衣程序 用于无菌区域。
5.1.6 收集 不锈钢 从无菌区域的传递箱中取出容器，并用无菌方法对容器进行消毒。 70%异丙醇溶液.
5.1.7 使用记号笔在所有培养板上标注采样日期、操作人员姓名以及当班人员信息。
5.1.8 联系被监控的操作员或相关人员，打开SCDA板，并告知他们戴上手套后用右手手指轻轻触碰板面。对于左手手指，则使用一个新的SCDA板，并重复相同的操作步骤。
5.1.9 关闭培养皿后，立即用70%的无菌异丙醇溶液消毒手指，并要求操作员前往更衣室更换新的无菌手套和防护服。
5.1.10 准备一个阳性对照平板：在SCDA平板表面划线接种任何一种沙门氏菌（Salmonella）、金黄色葡萄球菌（S. aureus）或铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）的纯培养物。对于阴性对照，无需划线，直接将平板放入培养箱中进行培养。
将所有平板倒置后，在20–25°C下孵育72小时，在30–35°C下孵育48小时。
5.1.11 孵育完成后，使用菌落计数器统计平板上形成的菌落总数。操作步骤如下： 菌落计数器 按照标准操作规程（SOP）执行，并将结果记录在相应的表格中。
5.2 采用表面拭子法
5.2.1 准确称取0.9克AR/LR级别的氯化钠，将其溶解在纯化水（PW）或注射用水（WFI）中，配制成生理盐水溶液。最后，用纯化水或注射用水将体积补足至100毫升。5.2.2 将棉签浸入生理盐水中湿润，然后按照所需数量准备好棉签，并将其放入1000毫升或3000毫升的烧杯中。
5.2.3 根据《高压灭菌标准操作规程（SOP）》，将生理盐水溶液和制备好的拭子置于121°C、15-psi的压力下进行高压灭菌处理，时间为20分钟。
5.2.4 将经过高压灭菌的拭子送至微生物实验室，并在室温下冷却。
5.2.5 将拭子通过无菌区域的物料入口处的传递箱转移到无菌区域内，并且人员必须按照无菌区域进入和更衣程序中的SOP，通过气锁（人员入口）进入无菌区域。
5.2.6 从……收集材料。 **传递箱（Pass Box）** 将无菌区域的物料移出，并用70%的无菌异丙醇溶液进行消毒。
5.2.7 打开容器，从管中取出拭子，然后在表面上均匀地、水平地擦拭约25平方厘米的面积。
5.2.8 将试管盖紧，并贴上标签，标签上应注明操作人员的姓名、实验地点的名称以及实验日期。对所有实验地点都需执行相同的操作程序。 分析样品时，不要长时间储存样品。.
5.2.9 通过传递箱将拭子无菌地转移到微生物实验室的 MLT（微生物检测）部门，并将所有样本拭子置于 LAF（层流柜）中。
5.2.10 拧开试管盖子，轻轻挤压后取出拭子棒，然后在已预培养的SCDA培养基平板上进行无菌涂布。
5.2.11 在预培养的SCDA培养基培养皿上标注采样人员的姓名、采样日期以及采样地点。
5.2.12 同时准备一个阳性对照样本：将细菌培养液（沙门氏菌、金黄色葡萄球菌或铜绿假单胞菌）涂布到已经预培养好的SCDA培养基培养皿上。
5.2.13 将所有平板倒置后，在20–25°C下培养72小时，在30–35°C下培养48小时。
5.2.14 孵育完成后，使用菌落计数器统计平板上形成的菌落数量，并记录每25平方厘米（cm²）的菌落数（cfu）。
5.3 通过接触平板法
5.3.1 按照培养基制备的标准操作规程（SOP）准备接触培养基平板，并对制备好的平板进行预培养，以检测是否存在污染。5.3.2 将接触板通过无菌区域的物料入口处的传递窗转移到无菌区域内，且人员必须通过该传递窗进入无菌区域。 **气锁室（Airlocks）** 根据无菌区域的进入和更衣程序标准操作规程（SOP），人员必须按照规定进行入场和更衣操作。
5.3.3 以无菌方式打开接触培养基平板，并轻轻触摸平板表面，在防护服的指定位置进行采样。
5.3.4 在接触SCDA培养基的平板上标注人员姓名、日期和地点。
5.3.5 关闭培养皿，并将其保存在……中。 **倒置位置**.
5.3.6 使用……清洁工作服所覆盖的区域。 消毒剂 样品的采集地点。
5.3.7 将取样时穿的隔离衣取下，送到指定的更衣室进行清洗和高压灭菌。在继续工作之前，请更换另一件隔离衣。
5.3.8 将所有平板倒置后，在20–25°C下培养72小时，在30–35°C下培养48小时。记录观察结果。
5.4 注意事项
5.4.1 如果采用拭子法，结果应表示为每25平方厘米的菌落形成单位（CFU）。5.4.2 在测试过程中保持无菌环境。
5.4.3 人员监控应在气锁区域内进行。
5.4.4 在完成手指点触测试后，立即用无菌的70%异丙醇溶液对手部进行消毒。
5.4.5 当采用手指点触法（finger dab method）时，结果必须以五个手指的宽度来表示。
5.5 频率：无菌区域的人员监控——在灌装过程结束后及期间，每天进行一次。
5.6 限度/验收标准
人员监控
等级：G 手套：G 人员工作服：G
A <1 5
B 5 5
手指接触：A级 <1 cfu/平板，B级 < 0.5 cfu/平板
无菌服：<05 cfu/平板。
6.0 缩写词
标准操作规程（SOP）QA：质量保证
QC：质量控制