1.0 所需设备
LAF量筒
无菌培养皿
所需材料 2.0
消毒剂无菌生理盐水溶液
无菌且熔融冷却后的大豆酪蛋白消化琼脂
测试菌种：大肠杆菌（E. coli）、金黄色葡萄球菌（Staph. aureus）、铜绿假单胞菌（Ps. aeruginosa）、白色念珠菌（C. albicans）、沙门氏菌（Salmonella）。
3.0 程序
3.1 来自最近培养的 库存培养物 每种测试微生物的； **子培养** 根据下面给出的各种媒体倾向，在各自的媒体表面上……
S.No.
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微生物；生物体
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类型
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中等；中度
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培养温度和培养时间
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1
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白色念珠菌
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MTCC 227
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**Sabouraud**
葡萄糖琼脂
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在20-25°C的温度下保存48小时。
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2
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大肠杆菌
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MTCC4313
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大豆酪蛋白
消化琼脂（Digest Agar）
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30-35°C，持续24小时
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3
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**Ps. aeruginosa**
（注：此为专有名词，通常指“铜绿假单胞菌”，在制药和生物技术领域中常用。中文通常直接译为“铜绿假单胞菌”或“铜绿菌”。）
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MTCC1688
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大豆酪蛋白
消化琼脂（Digest Agar）
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在30-35°C的温度下保持24小时。
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4
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金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
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MTCC737
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大豆酪蛋白
消化琼脂（Digest Agar）
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30-35°C，持续24小时
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5
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沙门氏菌
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MTCC 3858
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大豆酪蛋白
消化琼脂（Digest Agar）
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30-35°C，持续24小时
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3.2 使用约10毫升含有蛋白胨（0.1% w/v）的无菌生理盐水，收集培养物，并用无菌生理盐水适当稀释，使细胞数量达到约1×10^6个/毫升。8 每毫升
3.3 通过十倍系列稀释法，确定每种悬浮液中的菌落形成单位（cfu）数量。
3.4 转移 1.0 毫升的 培养悬浮液 将...加入含有9.0毫升无菌生理盐水的试管中，以获得10毫升的溶液。-1 稀释。
3.5 将10毫升溶液中的1.0毫升转移到另一个容器中。-1 将样品稀释至含有9.0毫升无菌生理盐水的试管中，以获得10倍的测试稀释液。-2.
3.6 同样地，将培养液进行系列稀释，以获得浓度为10的稀释液。-3, 10-4, 10-5, 10-6, 10-7 以及10-8.
3.7 从10倍稀释液中共取1.0毫升用于检测。-6, 10-7 以及10-8 将样品分两份，分别接种到90毫米的无菌培养皿中。
3.8 在每个培养皿中倒入约20至25毫升已冷却的无菌大豆酪蛋白消化琼脂。
3.9 对所有培养物采用相同的稀释方法，并根据稀释倍数和测试微生物的种类进行相应的标记。
3.10 允许平板在室温下固化，然后按照上表中的规定进行倒置并单独培养。
3.11 计算菌落数量，确定培养液的浓度，并按照规定的格式将结果制成表格。
3.12 使用上述已知的培养细胞（约10个）8 将（cfu）单独接种到25平方厘米的表面上。
3.13 允许将接种后的培养物在室温下自然风干。
3.14 准备 消毒液 根据《消毒剂溶液制备标准操作规程》（SOP）进行测试，并将其涂抹在人工污染的表面上。
3.15 在0分钟、5分钟、10分钟、20分钟以及30分钟后立即取样进行拭子检测，随后按照相关程序继续进行拭子测试。 拭子检测的标准操作规程（SOP）.
3.16 按照上表中的规定进行平板培养，并将结果按照指定的格式制成表格。
3.17 当在20分钟和30分钟后，每种培养物的拭子检测均未出现生长时，表明测试样品在指定浓度下是有效的。4.0 注意事项
4.1 人工污染的区域应在工作完成后立即进行清洁。4.2 在测试过程中必须佩戴手套和口罩。
4.3 所有用于稀释和测试的玻璃器皿，应立即…… 清洁并灭菌 按照标准操作规程（SOP）执行。
相关： **消毒剂抗性**
5.0 频率
对于每一批货物（或产品）：6.0 缩写
标准操作规程（SOP）QA：质量保证
QC：质量控制
NA: 不适用
WFI：注射用水
LAF：层流空气
另请参阅： 消毒剂效力的验证