微生物培养基制备的标准操作规程（SOP）

5.1 要求

5.1.1 平衡
5.1.2 干燥培养基
5.1.3 高压灭菌器
5.1.4 层流空气
5.1.5 玻璃器皿

5.2 培养基的制备（使用脱水培养基）

5.2.1 将脱水培养基储存在密封包装中，置于阴暗处，或按照制造商的指示进行储存。
5.2.2 称取所需量的脱水培养基，并将其加入含有...的烧瓶中。 纯化水.
5.2.3 用纯化水补足所需的体积。
5.2.4 在使用前，需检查培养基的pH值。 灭菌 在灭菌后，如果需要，根据培养基容器上的说明，使用 HCl 或 NaOH 溶液调整 pH 值。
5.2.5 按要求将培养基分配到培养瓶或试管中。
5.2.6 用可高压灭菌的塑料盖或棉塞盖住烧瓶和试管，并用蜡纸或铝箔包裹起来。按照相关程序将材料装入容器中。 高压灭菌器操作标准操作规程.
5.2.7 除非另有规定，否则应使用高压蒸汽灭菌器（autoclave）在121°C下、15磅的压力下对培养基进行15分钟的灭菌处理。
5.2.8 将制备好的培养基的详细信息记录在“培养基制备登记表”中。
5.2.9 同时在《高压灭菌器操作标准操作规程（SOP）》中的“高压灭菌器灭菌记录”部分进行相关记录的填写。
5.2.10 将培养基在30至35°C的温度下预培养48小时。
5.2.11 对于液体培养基，需通过目视检查是否存在浑浊现象；对于固体琼脂培养基，则需观察是否有菌落形成。如果发现任何生长迹象，应立即丢弃该培养基。
5.2.12 对每批灭菌培养基进行阳性对照试验。
5.2.13 预培养后的无菌固体琼脂培养基和液体培养基应在25°C以下储存，储存时间不得超过15天。

5.3 倒置平板的制备

5.3.1 按照培养基制备说明重新配制培养基，并对其进行灭菌处理。
5.3.2 在无菌条件下，将培养基冷却至45°C以下，然后分装15–20毫升到直径为9至10厘米的无菌培养皿中。培养皿底部应标明培养基的名称、批号以及制备日期。
5.3.2 允许培养皿中的物质固化并倒置。将培养皿在30°C至35°C的温度下预培养48小时。
5.3.4 目视检查是否存在任何…… 污染；杂质如有必要，请丢弃。

5.4 斜面和底部的制备

5.4.1 在重新水化培养基后，将琼脂溶解于培养基中。
5.4.2 将约10毫升的液体分装到18个150毫米的试管中。用不吸水的棉塞塞住试管口，并用蜡纸盖住试管。
5.4.3 按照标签上提供的培养基制备说明进行灭菌处理。
5.4.4 从高压灭菌器中取出试管，将其放置成倾斜状态，然后将其放入试管架中以进行后续测试。
5.4.5 确保斜面的顶部不接触棉塞，并让其充分固化。
5.4.6 在适当的温度下预培养48小时。
5.4.7 目视检查是否存在污染。如有必要，予以丢弃。
5.4.8 请在试管上适当标注培养基的名称、批号以及制备日期。
5.4.9 将斜面培养物在25°C以下预培养后进行储存。

5.5 RODAC板的制备

5.5.1 按照培养基制备说明重新配制培养基，并对其进行灭菌处理。
5.5.2 将培养基冷却至适宜温度，然后加入无菌物质。 RODAC plates 在无菌条件下进行操作。RODAC平板的底部应标明培养基的名称、批号以及制备日期等详细信息。

5.6 媒介/灭菌负载编号的可追溯性

5.6.1 每批制备并灭菌后的培养基都会被分配一个特定的批号，该批号为8位数字，具体格式如下所示。
XX-YYZZM
“XX”表示制备培养基的序列编号。
YY: 表示月份
ZZ：表示年份。
M：表示介质的缩写。
5.6.2 所有制备/灭菌的培养基批次都应按照月份进行序列编号。
记录所有使用的培养基的名称及其具体的批号。 微生物检测 在分析数据表中。
5.6.3 阳性对照菌株
枯草芽孢杆菌 NCIM 2063（或同等菌株）
白色念珠菌 NCIM 3471（或同等菌株）
对于差异化和选择性培养基，需按照容器上标注的指示，用相应的微生物进行接种，接种浓度应低于100 cfu/ml。

6.0 缩写词

6.1 HCl：盐酸
6.2 NaOH：氢氧化钠
6.3 质量控制（Quality Control）
6.4 IPA：异丙醇
6.5 NCIM：国家工业微生物菌种库
6.6 Dept.: 部门
6.7 SOP：标准操作规程