微生物培养定量分析的标准操作规程（SOP）

1.0 目标

用于描述一种培养物定量分析的程序。

2.0 范围

该标准操作规程（SOP）适用于培养物的定量分析。

3.0 责任

微生物学家 - 质量控制部门

4.0 责任制

质量控制经理

5.0 程序

5.1 为了进行实验，需要选择24小时龄的细菌培养物、酵母培养物以及已经产孢的真菌培养物。
5.2 需要选择的培养物包括环境分离株，具体包括：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、沙门氏菌属（Salmonella sp.）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、大肠杆菌（E. coli）、白色念珠菌（Candida albicans）和黑曲霉（Aspergillus niger）。
5.3 培养基的制备
5.3.1 准备 培养基 根据……的规定；按照……的要求 培养基制备的标准操作规程（Standard Operating Procedure for Media Preparation） 并对用于生育测试的培养基进行确认（即确保其符合相关质量标准）。

5.4 培养物的定量分析

5.4.1 取24小时龄的细菌培养物，使用无菌操作将其接种到预先灭菌的9毫升蛋白胨水中。
5.4.2 将收集到的培养物用无菌方法稀释到预先灭菌的9毫升含有蛋白胨的水中（即培养基中）。 **微量移液器** 提示；建议。
5.4.3 真菌培养的定量分析：使用无菌生理盐水和无菌玻璃珠进行收集。
5.4.4 对培养物进行系列稀释，稀释倍数分别为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10。
5.4.5 进行1毫升样品的倾注平板接种操作。 培养悬浮液 从所有稀释液中各取两份，分别加入用于细菌培养的SCDA培养基和用于真菌培养的SDA培养基（培养基的温度应保持在40°C-45°C之间）。
5.4.6 将细菌培养物在30°C至35°C的温度下培养72小时，将真菌培养物在20°C至25°C的温度下培养5天。
5.4.7 根据附录I的要求，记录孵育后的结果。
5.4.8 选择稀释度，使其介于 10 至 100 cfu/ml 之间。将所有稀释液冷藏在 2°-8°C 的温度下。
相关： 微生物培养物的维护

6.0 缩写词

6.1 标准操作规程（Standard Operating Procedure）
6.2 SCDA - 大豆酪蛋白消化琼脂
6.3 Cfu - 菌落形成单位（Colony Formation Unit）
6.4 SDA - 萨博劳德葡萄糖琼脂（Saboraud’s Dextrose Agar）

微生物名称	传代培养日期	B. 培养物数量	接种/培养日期	培养时间与温度	媒体批次编号

稀释	计数结果已获得。
	微生物名称
10-1
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
10-8
10-9
10-10
培养物滴度值
使用的稀释体积和悬浮液
完成日期