1.0 程序
1.1 验证测试程序：
请提供您希望翻译的英文术语或短语，我会为您生成相应的简体中文翻译。 HVAC系统 在成功完成以下测试后，将认为其具备一致且可靠的性能，从而符合要求（通过验证）。
1.1.1 空气流速测量研究1.1.2 HEPA过滤器的完整性测试
1.1.3 差压监测
1.1.4 非活性颗粒物监测
1.1.5 停电恢复研究
1.1.6 气流方向
1.1.7 微生物监测
1.1.8 照明和噪音水平监测
1.1.9 温度和相对湿度监测
1.1.10 生物去污研究
1.1.11 灭菌室泄漏测试
为了使该系统符合要求，上述测试必须满足各测试程序中规定的验收标准。完成确认测试后，所有生成的数据将被汇总起来，以评估该隔离系统维持设计条件的能力。
1.2 检箱和手套泄漏测试：
1.2.1 目标：
1.2.1.1 为了证明该隔离器的泄漏率符合 ISO 10648-2:1994(E) 标准中规定的 IV 级防护等级要求。1.2.1.2 为了证明连接到隔离器上的手套没有泄漏。
1.2.2 测试要求：
1.2.2.1 校准过的数字温度计
1.2.2.2 校准过的温度计
1.2.2.3 校准后的差压表
1.2.2.4 压缩空气
1.2.3 测试程序：
1.2.3.1 在测试过程中，应使用温度计和气压计在靠近隔离器的位置测量室温及气压。
1.2.3.2 隔离器内的温度计应在封闭所有开口之前，悬挂在隔离器内部的中央位置。
1.2.3.3 在开始泄漏测试之前，需要确保待测试的封闭容器内的温度和压力以及测试室内的温度和压力都稳定下来。
1.2.3.4 将封闭空间的正压设置为所需的250帕斯卡（Pa），然后关闭提取阀。
1.2.3.5 当压力和温度稳定后，关闭阀门以隔离封闭空间，然后以15分钟为间隔测量封闭空间内的温度和压力，同时记录环境压力。
1.2.3.6 首次和最后一次的测量结果用于评估；中间的测量结果用于控制测试条件。
1.2.3.7 在测试过程中（持续时间为1小时），必须满足以下条件：
· 内部围护结构内的相对压力变化应低于初始值的30%。
· 内部温度变化应低于 +0.3 °C。
大气压力的变化应低于100帕斯卡（Pa）。
如果这些条件没有完全满足，测试必须重新进行。
1.2.3.8 温度和压力之间的影响可以概括为：内部温度每升高1°C，内部压力就会增加350帕斯卡（Pa）。
1.2.3.9 测试报告应包含在指定时间间隔内的温度和压力测量数据。测量值、计算出的泄漏率以及评估结果应按照以下公式进行记录：
60 P由于您提供的内容仅为“n”这一个字符，它没有具体的含义或上下文，因此我无法为您生成准确的翻译。请提供更多的信息或上下文，以便我能够为您提供准确的翻译。T1
每小时泄漏率（T）由于您提供的内容“f”是一个字母，没有具体的含义或上下文，我无法为您翻译它。请提供更多的信息或上下文，以便我能够为您提供准确的翻译。) = ------X {---------- - 1}
由于您提供的文本 "t" 是一个字母，没有具体的含义或上下文，我无法为您翻译它。请提供更多的信息或上下文，以便我能够为您提供准确的翻译。 P1T由于您提供的内容仅为“n”这一个字符，它没有具体的含义或上下文，因此我无法为您生成准确的翻译。请提供更多的信息或上下文，以便我能够为您提供准确的翻译。
“Where...”
t 是测试的持续时间，单位为分钟。
P由于您提供的内容仅为“l”这一个字符，它没有明确的含义或翻译成中文的依据。请提供更多的上下文或信息，以便我能够为您提供准确的翻译。 这是首次测量时的绝对压力，单位为帕斯卡（Pascals）。
Pn 是最后一次读数时的绝对压力，单位为帕斯卡（Pascals）。
T由于您提供的内容仅为“l”这一个字母，它没有明确的含义或翻译成中文的依据。请提供更多的上下文或信息，以便我能够为您提供准确的翻译。 这是第一次测量时的温度，单位是开尔文（Kelvin）。
由于您提供的文本 "T" 是一个字母，没有具体的含义或上下文，我无法为您翻译它。请提供更多的信息或上下文，以便我能够为您提供准确的翻译。由于您提供的内容仅为“n”这一个字符，它没有具体的含义或上下文，因此我无法为您生成准确的翻译。请提供更多的信息或上下文，以便我能够为您提供准确的翻译。 这是最后一次读数时的温度，单位是开尔文（Kelvin）。
1.2.4 验收标准： 根据 ISO 10648-2 标准，隔离器的密封性应符合 4 级防护等级（Class 4 containment enclosure）的泄漏要求。
1.3 空气流速测量研究：
1.3.1 目标：
为了证明该空气系统能够平衡空气流量，并确保在HEPA过滤器下游的最低截面流速达到0.45米/秒。 + 在灌装线隔离器的 HEPA 过滤器下游 6 英寸处，测量得到的浓度为 20%。
1.3.2 测试要求： 已校准的 Thermo 风速计
1.3.3 程序：
1.3.3.1 将隔离器的风机“打开”（Switch the blowers on）；让风机运行15分钟以进行稳定（Let the blowers run for 15 minutes for stabilization）。
1.3.3.2 测量每个HEPA过滤器的风速（单位：英尺/分钟）。将仪器的传感器放置在过滤器格栅下方约6英寸处，并距离过滤器格栅边缘6英寸的位置。按照图示进行5次测量，然后计算这5次测量值的平均值。
1.3.3.3 将结果乘以60，以计算每小时的产量。
1.3.3.4 如果房间内有多个过滤器，需要分别计算每个过滤器的空气流量（每小时的处理量）。
1.3.3.5 将每小时输送到房间内的总空气体积（即每小时的处理量）除以房间的体积，得到…… 每小时换气次数.
1.3.3.6 将平均速度乘以仪器的校准系数，并记录读数。
1.3.3.7 测量时间应至少为15秒。
1.3.4 接受标准： HEPA过滤器下的最小横截面流速应不低于0.45米每秒。 + 20% 或 90 FPM+ 20%.
1.4 HEPA过滤器完整性测试 [DOP（邻苯二甲酸二辛酯）POA（聚α-烯烃）]：
1.4.1 目标： 为了确认安装在隔离器中的HEPA过滤器的完整性。
1.4.2 测试要求：
1.4.2.1 校准后的气溶胶光度计1.4.2.2 校准过的；经过精确调整的
1.4.2.3 压缩空气/氮气
1.4.3 程序：
1.4.3.1 将隔离器的风机“打开”（Switch the blowers of the isolators “ON”）。让风机运行15分钟以进行稳定化处理（Let the blowers run for 15 minutes for stabilization）。1.4.3.2 直接在...处对气溶胶进行检测。
1.4.3.3 打开气溶胶光度计，让其稳定运行五分钟。
1.4.3.4 上游环境中的DOP（挥发性有机化合物）浓度应控制在20至80毫克/升空气之间。将基线浓度设定为100%，并在光度计中检测其是否存在。
1.4.3.5 以不超过约10英尺/分钟的扫描速度，将接收器探头置于距离过滤器表面1英寸的位置，进行重叠扫描，检查HEPA过滤器的表面及边缘区域是否存在泄漏现象。
1.4.3.6 在扫描过程中，任何超过接受标准的泄漏情况都应被识别并记录下来。
1.4.4 接受标准： 在扫描过程中，...的百分比 DOP 通过光度计测得的PAO（光致氧化）渗透率应小于0.01%，并且通过安装接头处的渗透率应为“零”。
另请参阅： 暖通空调系统验证测试
1.5 差压监测：
1.5.1 目标： 这项测试的目的是为了证明…… **压差** 在隔离器的 HEPA 过滤器中，新鲜空气（BIBO）、排风空气（BIBO）和回风空气（BIBO）的参数均处于设计范围内。
1.5.2 测试要求：
1.5.2.1 校准过的马格尼赫利克流量计
1.5.3 程序：
1.5.3.1 将灌装线的隔离器风机切换到“过程模式”（process mode）。让隔离器在这种运行条件下稳定运行约30分钟。检查并记录进气速度、隔离器腔室的压差以及新鲜空气、排风和回风（BIBO，即“袋进袋出”系统）的HEPA过滤器之间的压差设定值。1.5.3.2 使用已安装的 Magnehelic 压力计或外部压力测量设备来记录压力数据。至少连续 3 天监测隔离器内 HEPA 过滤器、新鲜空气、排风空气和回风之间的压差。
1.5.3.3 差压记录应至少保存3天，并记录相关观察结果。
1.5.4 接受标准：
1.5.4.1 灌装、冻干和封盖操作区的压力应分别控制在70-80帕斯卡、60-70帕斯卡和50-60帕斯卡之间。1.5.4.2 过滤隔离器的压力应保持在60-80帕斯卡之间。
1.5.4.3 与相邻房间相比，制造区和外部清洗区的隔离器压力应不低于-40至-60帕斯卡。
1.5.4.4 BIBO过滤器两端的压降应保持在50至200帕斯卡之间。
1.6 温度与相对湿度监测：
1.6.1 目标： 本次测试的目的是验证这些隔离器是否能够维持所需的温度和…… 相对湿度 按照操作指令中的定义。
1.6.2 测试要求：
1.6.2.1 校准后的数据记录仪1.6.2.2 校准过的温度和相对湿度传感器/变送器
1.6.3 程序：
1.6.3.1 在开始研究之前，请确保隔离器的空调系统在测试开始前至少连续运行一小时。1.6.3.2 确保测量仪器处于校准状态，并持有有效的校准证书。按照附录-1中规定的位置安装温度和相对湿度传感器（transmitters）。
1.6.3.3 应在工作高度进行分布研究。使用间隔为5分钟的监测设备，对隔离器内部的温度和相对湿度至少进行24小时的连续监测。
1.6.3.4 应通过延长生产运行时间来进行温度和相对湿度研究，以确定操作过程中的最大热负荷。
1.6.4 接受标准：
1.6.4.1 隔离器内的温度不得超过23摄氏度。+ 2摄氏度。1.6.4.2 隔离器内的相对湿度不应超过55%。 + 5 %.
1.7 非活性颗粒物监测：
1.7.1 目标： 本次测试的目的是验证隔离器内部的空气颗粒浓度是否符合ISO等级要求。
1.7.2 测试要求： 校准后的非活性颗粒计数器
1.7.3 程序：
1.7.3.1 将隔离器的模式切换到“过程模式”（process mode）。核实所有隔离器进风口空气速度以及HEPA过滤器两侧压差的设定值。1.7.3.2 让这些隔离器在这种操作条件下稳定运行大约30分钟。记录所有隔离器进风口空气速度以及HEPA过滤器两侧的压差的实际数值。
1.7.3.3 将测量探头通过硅胶管连接到颗粒计数器上。根据附录2中提到的不同采样位置的操作规程，设置颗粒计数器。这些采样位置位于隔离器内的工作高度区域，用于非活性颗粒计数监测。
1.7.3.4 每个采样点的空气样本体积应为1立方米。3使用0.2微米过滤器的净化装置对采样端口进行净化处理。请在测试开始时进行这项操作。
1.7.3.5 将探针连接到采样端口。将采样探针垂直向上放置。在操作过程中，所有设备都应保持最佳运行速度。
1.7.4 接受标准：
1.7.4.1 0.5微米颗粒 - 不允许存在（NMT） 35201.7.4.2 > 5.0微米颗粒 - 不允许存在（NMT） 29
1.8 电源故障恢复研究：
1.8.1 目标： 本次测试的目的是验证停电对隔离器内部空气中颗粒浓度的影响。
1.8.2 测试要求： 校准后的非活性颗粒计数器
1.8.3 程序：
1.8.3.1 确保所有隔离器都处于清洁状态。1.8.3.2 确保非活性颗粒计数器处于有效状态，并且具有有效的校准证书。
1.8.3.3 将颗粒计数器安装在隔离器的中心位置。
1.8.3.4 采样频率应为一分钟，并将颗粒计数器的延迟时间设置为不超过10秒。
1.8.3.5 打开隔离器。
1.8.3.6 大约30分钟后，在静止状态下将空气中的颗粒计数器设置为自动模式并启动。
1.8.3.7 在样品采集大约一分钟后，关闭隔离器以模拟停电情况，并记录下累积计数达到0.5或5时的具体时间。由于“m”本身不是一个常见的英文术语或短语，在制药行业的技术文档中也没有明确的含义或用法，因此无法提供准确的翻译。如果您能提供更多的上下文或说明“m”的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。 颗粒超标。
1.8.3.8 启动隔离器，并记录下两种微生物的累积计数达到0.5时的具体时间。由于“m”本身不是一个常见的英文术语或短语，在制药行业的专业术语中也没有明确的对应中文翻译。如果“m”是某个特定上下文中的缩写或代码，建议提供更多的背景信息以便进行准确的翻译。如果“m”只是一个普通的字母，那么它通常不会被翻译，因为它不表示任何具体的含义。 或者5由于“m”本身不是一个常见的英文术语或短语，在制药行业的专业术语中也没有明确的对应中文翻译。如果“m”是某个特定缩写（如“mg”代表“milligram”或“mRNA”代表“messenger RNA”），则需要提供更多的上下文信息才能给出准确的翻译。如果“m”是某个专有名词或缩写，建议提供其全称以便进行准确的翻译。 颗粒数量几乎与初始计数相同。
1.8.4 接受标准：
1.8.4.1 隔离器在断电期间应至少保持规定的等级限制（class limits）两分钟。1.8.4.2 所有灌装线隔离器的恢复时间（即从初始状态恢复到几乎达到初始计数水平所需的时间）不应超过5分钟。
1.9 照明和声音水平监测：
1.9.1 目标： 本次测试的目的是验证隔离器内部的照明情况以及隔离器产生的噪音水平。
1.9.2 测试要求：
1.9.2.1 校准后的光强度计1.9.2.2 校准过的声级计
1.9.3 程序：
1.9.3.1 确保所有隔离器都处于清洁状态。1.9.3.2 将隔离器的“开关”打开。让鼓风机运行30分钟以进行稳定化处理。
1.9.3.3 将光强度计的测量范围设置为0-1999勒克斯（LUX），然后在工作场所进行读数测量。
1.9.3.4 将声级计的权重设置为A级，测量范围设定在50~80分贝之间，并确保其响应范围覆盖满量程（Full scale）。
1.9.3.5 从一米的距离读取声级数据，并详细记录相关信息。
1.9.4 接受标准：
1.9.4.1 隔离器内的照度水平不应低于500勒克斯（LUX）。1.9.4.2 距离一米处的声音强度不应超过90分贝（dB）。
1.10 空气流动方向（烟雾测试）
1.10.1 目标：
1.10.1.1 为了验证正压隔离器内的单向平行气流，并确认HEPA过滤单元能够有效限制空气的扩散和湍流，从而维持ISO-5级别的环境条件。1.10.1.2 为了验证负压隔离器内的负压气流情况，从而确保隔离器内部始终处于负压状态。
1.10.2 测试要求： 雾发生器（甘油）和数码相机
1.10.3 程序：
1.10.3.1 将隔离器的“开关”打开。让鼓风机运行30分钟以进行稳定化处理。1.10.3.2 将烟雾发生器对准HEPA过滤器下方的气流方向。
1.10.3.3 确认烟雾的传播方向与气流方向平行。
1.10.3.4 在每个关键点都要拍摄视频。 确保在完成测试后立即对安装的设备进行清洁和消毒。
1.10.4 接受标准： 烟雾流动模式应与隔离器手册中规定的设计规范一致，并且必须保持稳定。
1.10.4.1 从地面到工作高度的单向气流1.10.4.2 从高效空气过滤器（HEPA）到排气口的流程
1.11 微生物环境监测：
1.11.1 目标： 该测试的目的是验证这些隔离器能否在微生物方面保持所需的清洁度。 污染；杂质 按照国际标准的定义。
1.11.2 测试方法： 在微生物监测下，应进行三种类型的测试，即主动采样、被动采样和表面监测。
1.11.3 被动空气采样（沉降平板法）：
1.11.3.1 将隔离器的“开关”打开。让鼓风机运行30分钟以进行稳定化处理。将标记好的培养板放置在附录-3中列出的隔离器内的指定位置。1.11.3.2 确保琼脂表面能够与外界环境接触：取下培养皿的盖子，然后将培养皿放置在相邻的位置。
1.11.3.3 在4小时的暴露时间结束后，记录下暴露的具体时间，然后关闭盖子并将装有样品的培养皿转移到不锈钢容器中。随后将整个容器带回实验室。
1.11.3.4 从一批待带入生产区域的平板中保留一个未暴露于外界的平板作为阴性对照，并对其进行相应的标记。
1.11.3.5 将所有暴露于特定环境下的SCDA平板与阴性对照一起，在20-25°C下培养3天，然后在30-35°C下继续培养2天。
1.11.3.6 执行；实施；进行 被动采样 在灌装线隔离器内进行操作，持续时间为3天。
1.11.4 活性空气采样：
1.11.4.1 将隔离器的“开关”打开。让鼓风机运行30分钟以进行稳定化处理。1.11.4.2 将空气采样器放置在指定位置，将带有标签的培养皿放入采样头中，并打开培养皿的盖子。
1.11.4.3 请注意不要触碰培养皿盖的内侧以及…… 筛选；过滤；细查 在此操作过程中。
1.11.4.4 用筛网封闭吸气头，然后启动空气采样器，采集1000升（1立方米）的空气样本。
1.11.4.5 将标记好的培养板放置在隔离器内指定位置。
1.11.4.6 将所有 SCDA 平板在 20–25°C 下培养 3 天，然后在 30–35°C 下培养 2 天。
1.11.4.7 执行；实施；进行 主动空气采样 在隔离器内每天工作03天。
1.11.5 表面监测（拭子法）：
1.11.5.1 将隔离器的“开关”打开。让鼓风机运行30分钟以进行稳定化处理。1.11.5.2 确定需要通过拭子采样的位置。
1.11.5.3 用无菌生理盐水湿润拭子，然后擦拭25厘米范围内的表面。2.
1.11.5.4 将拭子转移到已灭菌的生理盐水中，然后送往实验室进行检测，但储存时间不得超过…… 拭子保存时间期限.
1.11.5.5 过滤完成后，将含有过滤器的培养基平板在20–25°C下孵育3天，然后在30–35°C下再孵育2天。
1.11.5.6 执行；实施；进行 表面监测 在隔离器内每天工作03天。
1.11.6 验收标准：
等级；级别；品质
|
空气样本
|
**培养基平板**
（cfu/平板）菌落形成单位（colony-forming unit）
|
表面监测
（cfu/swab）菌落形成单位/拭子
|
A
|
<1
|
<1
|
<1
|
C
|
100
|
50
|
25
|
1.12. 生物去污研究：
1.12.1 目标：
为了证明使用汽化过氧化氢对阳性隔离器进行灭菌的效果。
1.12.2 测试要求：
1.12.2.1 VHP发生器（Fogstar Power Jet）
1.12.2.2 过氧化氢（15%）+ 过氧酸（0.2%）
1.12.3 测试方法：
1.12.3.1 阳性隔离器的生物去污循环需要使用过氧化氢蒸汽发生器。该发生器被安装在新鲜空气空调系统中（fresh air AHU），该系统为所有用于过滤、灌装、冻干和封盖操作的阳性隔离器提供空气。
1.12.3.2 过氧化氢蒸汽通过每个隔离器模块以及相关的 BIBO HEPA 过滤器进行循环，这一过程由隔离器鼓风机实现。这种控制状态将持续到整个循环的充气阶段结束。
1.12.3.3 必须进行氨气完整性测试，以确保灌装线的隔离装置和手套完全密封无泄漏。
1.12.3.4 用冷水配制2%的过氧化氢溶液，方法是将15%的过氧化氢溶液稀释至所需浓度。
1.12.3.5 发电机应通过调节蒸汽控制旋钮来设置，以确保隔离器内的气体浓度保持在5 ppm以上。
1.12.3.6 请按照附录-4中的要求，将每个腔室内的五个生物指标都保持不变。
1.12.3.7 启动生成器并记录H值。2O2 监测并记录腔室内的浓度以及隔离器各组件的状态。
1.12.3.8 生物指示物（BI）应每小时从每个位置清除，直到连续五小时均未检测到BI为止。
1.12.3.9 将收集到的生物指示物（BI）送至微生物实验室，在55°C至60°C的温度下培养7天。 观察几天，每天记录是否有生长迹象。生长的迹象是培养基变浑浊（呈现浑浊状态）；如果没有生长，培养基应保持清澈。
1.12.3.10 生物指示物（BI）的采集方式应尽可能减少不同样本之间的交叉污染风险。 BI的。
1.12.3.11 完成五小时运行后，关闭发电机并观察H值的变化。2O2 保持腔室内的浓度，并持续监测直至浓度降至1 ppm以下。
1.12.3.12 在性能确认研究期间，使用以下技术进行微生物监测：
· 主动空气采样（体积空气采样）
· 被动空气采样（沉降平板法）
· 表面监测（拭子法）
1.12.4 接受标准：
1.12.4.1 所有 Geobacillus stearothermophillus 生物指示菌的数量均为 106 在7天的培养期内不应出现任何生长。
1.12.4.2 在循环结束时，过氧化氢的浓度应低于1 ppm。
1.12.4.3 表面温度应保持在15至30摄氏度之间。
1.12.4.4 相对湿度应保持在30%至70%之间。
在以下情况下，需要对设备进行重新验证：
2.1.1 **地点变更。**
2.1.2 关键部件的详细分解。
2.2 计划中的重新验证：
S.No.
|
需要进行的测试
|
频率
|
1.
|
空气流速测量研究
|
6个月零2周
|
2.
|
HEPA过滤器的完整性测试
|
6个月零2周
|
3.
|
差压监测
|
在操作过程中
|
4.
|
温度和相对湿度监测
|
在操作过程中
|
5.
|
非活性颗粒物监测
|
在操作过程中
|
6.
|
停电恢复研究
|
每年 + 某月
|
7.
|
气流方向
|
每年 + 某月
|
8.
|
微生物监测
|
在操作过程中
|
9.
|
生物去污
|
6个月零2周
|
10.
|
灭菌室及手套泄漏测试
|
6个月零2周
|
11.
|
照明和声音强度
|
每年 + 某月
|
3.0 记录保存：
3.1 在执行每项测试程序后，将观察结果记录在性能确认记录中。
3.2 请整理并确认所有测试功能均已完成、核对无误，并将其附录到本文件中。 请确认针对这些偏差的批准措施已经落实，并且这些措施已经得到妥善解决，达到相关要求。
3.3 准备总结报告，并将其提交给验证核心团队以获得批准和授权。
3.4 将设备性能确认过程中观察到的差异记录在性能确认记录中。
3.5 当所有偏差都得到妥善解决，或者制定了一个经过批准的行动计划来确保这些偏差能够被解决时。
3.6 在开始验证研究之前，必须进行培训，并将培训内容以培训记录的形式记录下来。
4.0 参考文献：
4.1 ISO 10648-2：根据密封性进行分类及相关检测方法。
4.2 ISO 13408-6：医疗产品的无菌处理——隔离器。
4.3 使用过氧化氢蒸汽对区域进行熏蒸，Steris Corporation，俄亥俄州门托市
4.4 6手套隔离器（Walker barrier system）的VHP循环开发报告
提交人：
Alluri Sitaramaraju
Estima Pharma Solutions
电子邮件：alluri2025@estimapharma.com