药品中的热原检测

用于测量温度的电子设备的兔子固定箱应设计成仅通过松紧适中的颈圈固定兔子，而兔子的身体其他部分可以保持相对自由，以便它们能够以正常姿势坐着。实验前1小时必须将兔子放入这些箱子中，并在整个实验过程中一直待在里面。确保实验进行的房间温度与兔子生活区或实验前18小时内兔子所处环境的温度相差不超过3℃。实验前一夜及实验期间应停止给兔子喂食；实验期间也必须停止供水。

温度记录

使用精确的温度感应设备，例如临床用体温计、热敏电阻或其他合适的探头，并确保这些设备已经过校准，其精度达到0.1°C。同时，这些设备需要经过测试，以确认其最大读数能够在5分钟内获得。将体温计或温度感应探头插入实验兔的直肠，插入深度约为5厘米。在每次实验中，所有兔子的插入深度应保持一致。如果使用电子设备，应在注射待检测溶液前90分钟将其插入兔子的直肠，并在整个实验过程中保持该位置不变。在经过足够长的时间后（具体时间长度需根据先前确定的标准），记录下兔子的体温。
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初步试验（模拟试验）

如果动物首次用于热原测试，或者在过去两周内未曾使用过，那么在测试所研究的物质之前，应对其进行1至3天的适应处理。具体方法是将无热原的生理盐水（温度约为38.5°C）以每公斤体重10毫升的剂量通过静脉注射给动物。

记录动物的体温，至少在注射被检测溶液前90分钟开始记录，并持续到注射后3小时。如果任何动物的体温变化达到或超过0.6°，则不得将其用于主要试验中。

**主要检测项目**

使用三只兔子进行实验。样品的制备：将待检测的物质溶解在无热原的生理盐水中，或按照药典规定用其他溶液进行稀释。在注射前，将液体加热至约38.5°C。

程序；步骤；操作规程

从注射受试溶液前至少90分钟开始，每隔不超过30分钟记录每只动物的体温，并持续记录至注射后3小时。在注射试验剂量前的40分钟内，每隔30分钟记录每只兔子的“初始温度”，该“初始温度”为这40分钟内两次测量值的平均值。如果在测量“初始温度”时，任何一只兔子的体温两次连续读数之间的变化超过0.2°，则不应将其用于试验。在任何一组试验动物中，仅使用那些“初始温度”彼此之间变化不超过1°的动物，并且不得使用体温高于39.8°或低于38°的兔子。

将待检测的溶液缓慢注入每只兔子的耳缘静脉中，整个过程不得超过4分钟，除非相关专论中有其他规定。注射的样本量根据所检测的制剂而有所不同，具体用量需参照相应的专论。注射体积不得少于每公斤体重0.5毫升，也不得超过每公斤体重10毫升。注射后3小时内，每半小时记录一次每只动物的体温。将“初始温度”与“最高温度”（即记录到的最高体温）之间的差值视为该动物的反应结果。如果这个差值为负数，则结果计为零反应。

结果解读

如果三只兔子的反应总和不超过1.4°，且任何一只兔子的反应值小于0.6°，则该制剂通过测试。如果任何一只兔子的反应值达到或超过0.6°，或者三只兔子的反应总和超过1.4°，则需要使用另外五只兔子继续进行测试。如果八只兔子中最多只有三只兔子的反应值达到或超过0.6°，并且八只兔子的反应总和不超过3.7°，则该制剂也通过测试。
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