薄层色谱法是一种分离技术，其中溶质在两个相之间进行分配：一个是固定相，通过吸附作用起作用；另一个是流动相…… 流动相 以液体形式存在。吸附剂是一层相对较薄、均匀的干燥细粉材料，被涂覆在玻璃、塑料或金属片或板上。最常用的是玻璃板。根据所使用的支撑材料、其制备方式以及所使用的溶剂不同，分离过程也可以基于分配作用或分配作用与吸附作用的结合来实现。
(b) 一个用于对齐平板的托盘或平坦表面，在涂覆物质施加时，平板可以放置在该表面上进行对齐。
(c) 这种吸附剂或涂层材料由细小的颗粒组成，直径通常在5微米到40微米之间，适用于色谱分析。它可以直接涂覆在色谱板上，或者通过石膏（硫酸钙水合物）或其他方式固定在色谱板上。 合适的粘合剂该吸附剂可能含有荧光物质，以便于观察能够吸收紫外线的斑点。
(d) 一种涂抹器，当其在玻璃板上移动时，能够在整个玻璃板表面均匀地涂覆一层所需厚度的吸附剂。
(e) 用于在干燥和运输过程中支撑平板的存储架。
(f) 一个可容纳一个或多个培养板的培养箱，该培养箱能够被正确关闭和密封。培养箱内装有用于支撑培养板的支架，这些培养板可以背靠背放置，同时培养箱的盖子也需要处于关闭状态。
(g) 分度微量移液器能够精确移取10毫升及以下的微量液体。
(h) 一种喷雾器，能够喷出细小的雾状液体，并且自身不会被所喷出的试剂腐蚀或损坏。
(i) 一个 紫外线光适用于在短波长（254 nm）和长波长（365 nm）的紫外线下进行观察。
相关： 高效液相色谱（HPLC）的原理与工作原理
设备；仪器
(a) Flat glass plates of the appropriate size, which are suitable for applying the required amounts of the test solution and reference solutions at the designated points, and which accommodate the specified migration path length. These plates are prepared according to the following method; alternatively, commercially available pre-coated plates can also be used.(b) 一个用于对齐平板的托盘或平坦表面，在涂覆物质施加时，平板可以放置在该表面上进行对齐。
(c) 这种吸附剂或涂层材料由细小的颗粒组成，直径通常在5微米到40微米之间，适用于色谱分析。它可以直接涂覆在色谱板上，或者通过石膏（硫酸钙水合物）或其他方式固定在色谱板上。 合适的粘合剂该吸附剂可能含有荧光物质，以便于观察能够吸收紫外线的斑点。
(d) 一种涂抹器，当其在玻璃板上移动时，能够在整个玻璃板表面均匀地涂覆一层所需厚度的吸附剂。
(e) 用于在干燥和运输过程中支撑平板的存储架。
(f) 一个可容纳一个或多个培养板的培养箱，该培养箱能够被正确关闭和密封。培养箱内装有用于支撑培养板的支架，这些培养板可以背靠背放置，同时培养箱的盖子也需要处于关闭状态。
(g) 分度微量移液器能够精确移取10毫升及以下的微量液体。
(h) 一种喷雾器，能够喷出细小的雾状液体，并且自身不会被所喷出的试剂腐蚀或损坏。
(i) 一个 紫外线光适用于在短波长（254 nm）和长波长（365 nm）的紫外线下进行观察。
相关： 高效液相色谱（HPLC）的原理与工作原理
平板的制备
除非专论中有其他规定，否则这些平板的制备方法如下：按照供应商的说明制备涂层物质的悬浮液，使用专用的涂布设备将悬浮液均匀地涂覆在20厘米长的平板上，涂层厚度为0.25至0.30毫米。将涂覆后的平板置于空气中晾干，然后在100°至105°的温度下加热至少1小时（对于使用纤维素制成的平板，通常加热10分钟即可），之后在防潮条件下冷却。储存时需保持平板的防潮性，并在制备后的3天内使用。使用前，如专论中有要求，可再次将平板晾干。方法；工序；方式
除非有特别要求使用非饱和条件，否则应按照以下步骤准备储罐：用滤纸覆盖储罐内壁；向储罐中加入流动相，使滤纸充分浸湿，形成5至10毫米深的溶剂层；然后关闭储罐并静置1小时。 室温从板的垂直两侧去除约5毫米宽的涂层物质。将待检测的溶液以直径约2至6毫米的圆形点状，或以条带状（除非另有规定，否则尺寸为10至20毫米×2至6毫米）施加在一条与板一端平行的线上，并且距离该端20毫米；这些点或条带之间的距离应为15毫米。
如有必要，可以分次施加溶液，并在每次施加后进行干燥。在板子的两侧，从起始线开始标记15厘米的距离（或按照专论中规定的距离）。待溶剂完全蒸发后，将板子放入容器中，确保板子尽可能保持垂直状态，并且斑点或条带位于流动相的液面以上。关闭容器，然后在室温下静置，直到流动相上升至标记线。取出板子并使其干燥。
对于二维色谱法，第一次洗脱完成后需将色谱板干燥，然后在与第一次洗脱方向垂直的方向上进行第二次洗脱。
当专论中规定的方法要求“避光”或“在弱光下”进行时，意味着整个操作过程都必须在这些条件下完成。
流动相：混合物中的次要溶剂成分；其含量相对变化范围为±30%，或绝对变化范围为±2%，以较大者为准；其他成分的绝对变化不得超过10%。
盐的浓度：在流动相的缓冲组分中；±10%；流动相水相的pH值：除非专论中有其他规定，否则为±0.2 pH；当检测中性物质时，pH值为±0.1。
如果培养皿中含有细小颗粒（2-10微米），则所施加溶液的体积应为规定体积的10-20%。
检测相关杂质：使用测试溶液得到的色谱图中的次要色谱峰，通过目视比较其与含有该杂质的参考溶液所得色谱图中的相应色谱峰，或者与使用测试溶液稀释后制备的参考溶液所得色谱图中的色谱峰进行比对。
如果需要，使用规定的试剂进行处理，并记录所有溶液所得色谱图中的反射率、透射率或荧光值。利用测量结果计算测试溶液中的物质含量。关于分辨率和分离度的要求在相应的专论中有明确规定。
对于二维色谱法，第一次洗脱完成后需将色谱板干燥，然后在与第一次洗脱方向垂直的方向上进行第二次洗脱。
当专论中规定的方法要求“避光”或“在弱光下”进行时，意味着整个操作过程都必须在这些条件下完成。
色谱条件的调整
为了满足系统适用性标准，可以对测试参数进行微调。这些调整可能包括：流动相：混合物中的次要溶剂成分；其含量相对变化范围为±30%，或绝对变化范围为±2%，以较大者为准；其他成分的绝对变化不得超过10%。
盐的浓度：在流动相的缓冲组分中；±10%；流动相水相的pH值：除非专论中有其他规定，否则为±0.2 pH；当检测中性物质时，pH值为±0.1。
如果培养皿中含有细小颗粒（2-10微米），则所施加溶液的体积应为规定体积的10-20%。
可视化
开发完成后，该平板应在最大输出波长约为254纳米或365纳米的紫外光下进行检测（具体取决于实际情况）。或者，也可以按照相关专论中的指示进行观察；如果规定了喷雾技术，必须确保试剂以细雾的形式均匀喷洒。所谓“次级斑点”，是指除主斑点以外的任何斑点；同样，“次级条带”是指除主条带以外的任何条带。半定量估计
**鉴别**：将使用测试溶液得到的色谱图中的主斑点，从颜色、大小以及Rf值（保留时间）三个方面，与使用参考溶液得到的色谱图中的相应斑点进行目视比较。检测相关杂质：使用测试溶液得到的色谱图中的次要色谱峰，通过目视比较其与含有该杂质的参考溶液所得色谱图中的相应色谱峰，或者与使用测试溶液稀释后制备的参考溶液所得色谱图中的色谱峰进行比对。
定量测量
在平板开发完成后，那些被分离出来的、对紫外-可见光（UV-Vis）有响应的物质，可以通过合适的仪器直接在平板上进行检测。检测方法是通过移动平板或测量设备来测量来自这些斑点的入射光的反射率。同样地，也可以使用适当的光学系统来测量荧光信号。设备；仪器
用于直接测量的装置包括：一个用于精确定位并将溶液精确施加到平板上的设备；一个用于沿x轴或y轴移动平板或测量设备的机械装置；一个记录仪以及相应的积分器或计算机；还有一个带有光源的光度计、一个用于产生单色光的光学装置以及一个具有足够灵敏度的光电传感器。对于荧光测量，还需要一个合适的滤光片，该滤光片能够阻挡激发光到达检测器，同时允许发射光或其特定部分通过。方法；方式；工序
按照各专论中的规定准备测试溶液和参比溶液。所有溶液均使用相同的溶剂，并且每种溶液的用量也应保持一致。制备并涂布不少于3份被检测物质的参比溶液，其浓度应覆盖测试溶液中预期的范围（大约80%、100%和120%）。如果需要，使用规定的试剂进行处理，并记录所有溶液所得色谱图中的反射率、透射率或荧光值。利用测量结果计算测试溶液中的物质含量。关于分辨率和分离度的要求在相应的专论中有明确规定。