强化培养基（Reinforced Medium）、Rappaport Vassiliadis 培养基、Wilson and Blair 的 BBS 球孢子琼脂（Wilson and Blair’s BBS Agar）、GN 营养肉汤（GN Broth）、三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）以及铋亚硫酸盐琼脂培养基（Bismuth Sulphite Agar Medium）等，均需在 115°C 和 10 psi 的压力下进行灭菌处理。这些培养基都是分别独立进行灭菌的。
这些 培养基 该培养基含有某些热敏成分，这些成分在121°C的温度下会降解，从而导致其营养价值丧失。因此，这种培养基不能用于支持特定微生物的生长。当这些培养基在高温下进行灭菌时，虽然微生物可能会存活，但由于热敏成分的降解，它们将无法形成特征性的菌落。
相关： 无菌制剂的最终灭菌
121°C的灭菌循环持续15分钟，但当温度降至115°C时，需要延长灭菌时间以确保有效杀死微生物。建议将115°C的灭菌循环时间设置为30分钟，或者可以通过相关公式进行计算。 D值假设在115°C下的D值为3.75，我们希望得到8。 对数减少值（log reduction value） 那么我们必须运行3.75次灭菌循环，每次循环持续8分钟，总共30分钟。
所有灭菌过程都必须经过验证。低温灭菌的验证使用枯草芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus）ATCC 5230来进行。含有枯草芽孢杆菌孢子的条带和安瓿瓶，其灭菌方法与常规产品相同。 高压灭菌器验证每条试纸含有1×10个单位。6 孢子。
孢子条需要在35°C的温度下，在大豆酪蛋白消化培养基中培养七天。如果灭菌过程有效，那么不应该观察到任何生长现象。 生物指示剂 浑浊度可以用来指示（某种情况或结果）。
浑浊度 – 灭菌不彻底
无浊度 – 灭菌过程合格。
如果使用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）安瓿作为生物指示剂，那么需要将培养基从安瓿中释放出来以促进孢子的生长。这些安瓿需要在35°C下培养七天，并观察安瓿颜色的变化。
另请参阅： 生物指标的性能评估