纸层析法是一种分离混合物成分的技术,其原理类似于柱层析法中的吸附层析。在这种方法中,一张具有适当质地和厚度的纸片充当吸附剂。由于纸张本身的天然含水量,或者纸张对液相中亲水成分的选择性抑制作用可以被视为固定相,因此溶质在两相之间的分配有助于各成分的分离。
或者,可以采用两相系统:其中一种相被浸渍到纸上,这种相保持静止状态,而另一种流动相则缓慢地在纸上移动,从而实现色谱分离。分离过程可以是向上的(ascending),此时流动相通过毛细作用被带到纸上;也可以是向下的(descending),此时流动相则向下移动。 流动相 也受到重力的作用。
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(b) 一个由耐腐蚀材料制成的支架,其长度比储罐内部高度短约5厘米,用于支撑溶剂槽以及防止液位倒流的杆子,这些杆子再用来固定色谱纸。
(c) 玻璃槽的长度应超过色谱纸片的宽度,且其容纳的溶剂体积需超过一次色谱分析所需的量。
(d) 重型玻璃制成的防虹吸杆应固定在支架上,其安装位置应在玻璃槽的外部、与槽边缘平行,并略微高于槽边缘。
(e) 使用特殊滤纸制成的色谱纸片,宽度至少为25毫米,且不超过槽体的长度;将滤纸剪成条状,长度大约与槽体的高度相等。在滤纸的一侧水平画一条细铅笔线,位置距离一端一定距离。当将滤纸片悬挂在防虹吸杆上(滤纸的上端接触槽体,下端悬空在腔室内)时,这条线应位于杆子下方几厘米处。在处理过程中需格外小心,避免因过度操作或接触灰尘表面而污染滤纸。
按照专论中规定的饱和溶剂用量,在罐底形成25毫米厚的溶剂层。关闭罐盖后,将其置于室温下静置24小时。
使用防虹吸杆将带有斑点的色谱片悬挂在溶液中,这些杆子固定着色谱片的上端。必须确保色谱片悬挂在杆子下方的部分能够在溶液中自由悬浮,不得接触到支架、罐壁或罐内的液体。
关闭容器,将试纸放入其中静置1.5小时。然后通过进样口加入足够量的规定流动相,再次关闭容器,并按照药典中规定的距离或时间进行展开操作,期间需避免试纸暴露在强光下。将试纸从容器中取出后,在药典规定的温度下空气中晾干。根据药典中的描述对斑点进行观察。预先确定含有分离组分的试纸部分(详见“仪器”部分)可以剪下,并用适当的溶剂进行洗脱;洗脱后的溶液应调整至已知体积,再通过适当的化学或仪器方法进行定量分析。
使用足够量的规定流动相,在槽中形成25毫米厚的层。如果使用两相系统,则需加入两种相。按照规定,将饱和溶剂倒入槽与罐壁之间的空间。关闭罐子,置于室温下静置24小时。将准备好的纸条放入罐中,盖上盖子,再静置1.5小时。然后将纸条浸入流动相中,按照药典中规定的距离或时间进行展开操作,展开过程中需避免纸条暴露在强光下。取出纸条后,按照药典中的规定温度在空气中晾干。
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设备;仪器
(a) 一种由玻璃、陶瓷或不锈钢制成的密封罐,配备有用于添加溶剂或释放内部压力的接口,并且设计得可以在不打开罐体的情况下观察色谱分析的进程。(b) 一个由耐腐蚀材料制成的支架,其长度比储罐内部高度短约5厘米,用于支撑溶剂槽以及防止液位倒流的杆子,这些杆子再用来固定色谱纸。
(c) 玻璃槽的长度应超过色谱纸片的宽度,且其容纳的溶剂体积需超过一次色谱分析所需的量。
(d) 重型玻璃制成的防虹吸杆应固定在支架上,其安装位置应在玻璃槽的外部、与槽边缘平行,并略微高于槽边缘。
(e) 使用特殊滤纸制成的色谱纸片,宽度至少为25毫米,且不超过槽体的长度;将滤纸剪成条状,长度大约与槽体的高度相等。在滤纸的一侧水平画一条细铅笔线,位置距离一端一定距离。当将滤纸片悬挂在防虹吸杆上(滤纸的上端接触槽体,下端悬空在腔室内)时,这条线应位于杆子下方几厘米处。在处理过程中需格外小心,避免因过度操作或接触灰尘表面而污染滤纸。
降纸色谱法
方法;工序;方式
待检测的样品被溶解在合适的溶剂中。所得溶液通过微量移液器滴加到铅笔线上,形成6至10毫米大小的斑点,这些斑点之间的距离应不少于3厘米。如果所需的总溶液体积会导致斑点直径超过6至10毫米,则需分多次滴加,每次滴加后需等待斑点完全干燥后再进行下一次滴加;或者,也可以将溶液以条带的形式(尺寸为10至20毫米×2至6毫米,除非另有规定)滴加到铅笔线上。按照专论中规定的饱和溶剂用量,在罐底形成25毫米厚的溶剂层。关闭罐盖后,将其置于室温下静置24小时。
使用防虹吸杆将带有斑点的色谱片悬挂在溶液中,这些杆子固定着色谱片的上端。必须确保色谱片悬挂在杆子下方的部分能够在溶液中自由悬浮,不得接触到支架、罐壁或罐内的液体。
关闭容器,将试纸放入其中静置1.5小时。然后通过进样口加入足够量的规定流动相,再次关闭容器,并按照药典中规定的距离或时间进行展开操作,期间需避免试纸暴露在强光下。将试纸从容器中取出后,在药典规定的温度下空气中晾干。根据药典中的描述对斑点进行观察。预先确定含有分离组分的试纸部分(详见“仪器”部分)可以剪下,并用适当的溶剂进行洗脱;洗脱后的溶液应调整至已知体积,再通过适当的化学或仪器方法进行定量分析。