1.0 目标
使用生物指示剂来验证高压灭菌器的灭菌效果。2.0 范围
该程序适用于质量控制实验室微生物学区域安装的高压灭菌器。3.0 责任
3.1 职位：技术助理（微生物学家）/执行职务3.2 检查：执行人员/经理
4.0 责任追究
部门负责人5.0 程序
5.1 频率：每年两次5.2 微生物：嗜热芽孢杆菌孢子（认证浓度为10）。6)
5.3 对用于验证目的的该批次/批次的 B.steriothermophilus 孢子条进行初始计数。
5.4 初始孢子计数：
5.4.1 将试纸条无菌地转移到100毫升的无菌生理盐水中，静置半小时后进行热处理；将试管置于70°C-80°C的水浴中加热15分钟。
5.4.2 通过用手掌托住试管或使用涡旋器旋转试管，使孢子悬浮液均匀混合。
5.4.3 根据初始计数结果，使用无菌生理盐水进一步稀释。
5.4.4 从不同的稀释液中各取两份样品进行检测，确保每个平板上的菌落计数不超过300个菌落形成单位（cfu/plate）。
5.4.5 将已经熔化并冷却至45°C至50°C的SCD琼脂培养基倒入预先准备好的培养皿中，轻轻摇晃后让其固化。
5.4.6 将平板置于培养箱中培养。 **倒置位置** 在55 ± 2°C的温度下保持48至72小时。
5.4.7 计算每个平板上的菌落数量，并根据稀释因子计算平均菌落数量。
5.4.8 如果初始计数不超过标签标示值的150%，且不低于标签标示值的75%，则可以使用该条带进行验证。
5.4.9 将结果记录在附录I中。
5.5 高压灭菌器验证
5.5.1 将附件和玻璃器皿装入高压灭菌器的腔室中。
5.5.2 按照以下步骤取所需数量的条带，贴上标签，然后放入高压灭菌器中处理。
5.5.3 将试纸条放入培养皿中，然后根据附录III和IV中提供的位置图，分别按照双门高压灭菌器和立式高压灭菌器的要求进行排列。
5.5.4 保留一条试纸不进行检测，作为阳性对照。
5.5.5 按照立式高压灭菌器的标准操作规程（S.O.P.）和双门高压灭菌器的标准操作规程（S.O.P.），在121°C和15磅的压力下运行高压灭菌器20分钟。
5.5.6 循环结束后，取出所有试纸条。
5.5.7 在无菌的SCD（大豆酪蛋白消化）培养基试管（10毫升）上标注位置编号、日期以及设备识别号。将培养基条无菌地转移到相应的标记好的SCD培养基试管中。
5.5.8 将一条未暴露的试纸条转移到SCD培养基试管中，并标记为“阳性对照”。
5.5.9 保留一个未接种菌种的SCD培养管作为阴性对照。
5.5.10 将所有试管在55°C ± 2°C的温度下孵育14天。
5.5.11 在含有试纸条的SCD培养基试管中，每天观察14天，以检测是否出现浑浊或菌落生长。
5.5.12 阳性对照应在72小时内显示生长现象。
相关： 新一代基因工程生物指示剂
5.6 解释
5.6.1 如果在任何SCD培养基试管中均未观察到细菌生长，则表明设备运行正常，性能满足要求。
5.6.2 如果在任何一种SCD培养基试管中观察到菌落生长，需鉴定该菌为耐热脂肪芽孢杆菌（B.stearothermophilus），并进行革兰氏染色。同时将其与阳性对照结果进行比较。如果检测结果不符合要求，应调查验证过程中的问题，并停止使用该设备。此时需要查明原因并重新进行验证。只有在验证通过后，该设备才能重新用于日常操作，并重复整个验证流程。
5.6.3 保存验证记录，并附上符合以下要求的校准卡。
设备名称：
识别编号：
验证频率：
验证日期：
验证截止日期：
验证工作由以下单位完成：
5.7 将结果记录在附录II中，并将灭菌循环记录图表与报告一起附上。
N.Saline = 生理盐水
hr. = 小时
cfu = 菌落形成单位
B.= 巴氏杆菌（Bacillus）
ml = 毫升
%= 百分比
°C = 摄氏度
U.S.P. = 美国药典
&= 表示“和”（equal to and）
S.O.P. = 标准操作规程
5.6 解释
5.6.1 如果在任何SCD培养基试管中均未观察到细菌生长，则表明设备运行正常，性能满足要求。
5.6.2 如果在任何一种SCD培养基试管中观察到菌落生长，需鉴定该菌为耐热脂肪芽孢杆菌（B.stearothermophilus），并进行革兰氏染色。同时将其与阳性对照结果进行比较。如果检测结果不符合要求，应调查验证过程中的问题，并停止使用该设备。此时需要查明原因并重新进行验证。只有在验证通过后，该设备才能重新用于日常操作，并重复整个验证流程。
5.6.3 保存验证记录，并附上符合以下要求的校准卡。
设备名称：
识别编号：
验证频率：
验证日期：
验证截止日期：
验证工作由以下单位完成：
5.7 将结果记录在附录II中，并将灭菌循环记录图表与报告一起附上。
6.0 缩写
SCD = 大豆酪蛋白消化物N.Saline = 生理盐水
hr. = 小时
cfu = 菌落形成单位
B.= 巴氏杆菌（Bacillus）
ml = 毫升
%= 百分比
°C = 摄氏度
U.S.P. = 美国药典
&= 表示“和”（equal to and）
S.O.P. = 标准操作规程
附件 - I
微生物生物学部门
初始生物指示物数量
指示菌名称：
声称的初始计数：
指示剂的形式
批次/批号：
生产/失效日期：
稀释液 ：0.9% 氯化钠注射液（生理盐水）
生长培养基：大豆酪蛋白消化琼脂
pH值：_________(7.3±0.2)
批号：
SCD肉汤 pH值：_________(7.3±0.2) 批号：
培养温度：
培养期
1毫升 1毫升 1毫升
稀释步骤：孢子计数 ----------> 100 ml ----> 10 ml ----> 10 ml ----> 10 ml
(Dil.1) (Dil 2) (Dil 3) (Dil 4)
结果：
稀释编号
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稀释因子
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“Aliquotes”
镀层的；电镀的
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CFU/plate
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表示“平均每平板（plate）的菌落形成单位（cfu）数”。
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CFU/ml
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CFU/strip
（注：CFU 是“Colony Forming Units”的缩写，表示“菌落形成单位”；strip 通常指用于检测的试纸条或检测条。）
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含义：表示“平均每条培养基条上的菌落形成单位（colony-forming units）数量”。在制药行业的微生物检测中，这个术语用于描述培养基条上细菌生长的平均数量。
|
实际初始计数：
评论：
微生物学家的签名：
报告日期：
质量控制负责人的签名：
附录-II
微生物生物学部门
高压灭菌器的验证
菌种：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子条（10条）6 cfu (Colony Forming Units)
制造日期：
有效期：
标签声明（Label Claim）
条带的位置和编号：
条带批号：
medium: 大豆酪蛋白消化培养基（SCD） 批次；批号 不。
pH值：__________（7.3 ± 0.2）
培养温度：55 ± 2℃oC
灭菌：温度：_______ oC
循环参数：保持时间：________分钟。
观察结果：
日期
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1由于“st”不是一个常见的英文术语或短语，在药学或技术领域的专业文献中也没有找到其明确的含义或用法。因此，我无法为您提供准确的翻译。如果您能提供更多的上下文或说明“st”的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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2nd
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3rd
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4由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的翻译词典中无法找到其对应的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明“th”的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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5由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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6由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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7由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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8由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的含义，因此无法提供准确的翻译。请提供更多的上下文或明确这个词的具体含义，以便我能够给出正确的翻译。
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9由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的翻译词典中无法找到其对应的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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10由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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11由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的含义，因此无法提供准确的翻译。请提供更多的上下文或明确这个词的具体含义，以便我能够给出正确的翻译。
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12由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果“th”是某个特定领域（如化学、技术或医学）的术语，或者是一个拼写错误，请提供更多的上下文信息，以便我能够给出准确的翻译。
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13由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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14由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的含义，因此无法提供准确的翻译。请提供更多的上下文或信息，以便我能够给出正确的翻译。
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条码编号：
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1
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签名；署名
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-ve = 无生长
阴性对照：_______
+ve = 生长
阳性对照：_______
评论：
签名：微生物学家
报告日期：
质量控制负责人的签名
附件一
质量控制实验室
高压灭菌器的验证
初始生物指示物数量
检测日期
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: _________________________
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完成日期
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: _________
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指标组织名称
批次/批号
生产日期／失效日期
培养基
培养温度及时间
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:_________________
:_________________
:_________________
大豆酪蛋白消化琼脂
pH值：____________（7.3±0.2）
在53°C至57°C的温度下保存2至3天。
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声称的初始数量：___________
载体材料：__________
稀释液：0.9%氯化钠溶液
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稀释步骤：
1毫升
(dil. 1) (dil. 2) (dil. 3) (dil. 4)
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稀释
编号：
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稀释
因素；要素
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**Aliquots**
（注：根据药学领域的专业术语习惯，"Aliquots"通常指从较大体积的溶液中分取的少量溶液，用于后续实验或分析。在中文中，可译为“分装样品”或“小份样品”。）
镀层的；电镀的
|
CFU/plate
|
含义：表示“平均每个平板上的菌落形成单位（colony-forming units）”。在微生物检测中，用于描述培养平板上细菌或真菌的生长情况。
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CFU/ml
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cfu/strip
（注：根据上下文，"cfu"通常指“菌落形成单位（Colony Forming Units）”，而“strip”可能指用于检测的试纸条或采样条。在制药行业中，这可能指的是用于细菌计数或微生物检测的试纸条。）
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1
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2
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平均菌落形成单位（cfu）/条：______________ 实际初始计数：_______________
验收标准：初始计数应不超过标签上声明数量的150%，且不低于标签上声明数量的75%。
分析员： 审核人：
日期 日期 :
附件二
质量控制实验室
使用生物指示剂对高压灭菌器进行验证
微生物名称
批号（Batch Number）
生产日期／失效日期
标签声明
灭菌温度
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:
:
:
:
:
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**使用的介质**
中批量编号
介质的pH值
培养温度
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大豆酪蛋白消化培养基
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:
:
: 53o从c到57
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无菌保持时间
加载时间
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:
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培养期；孵化期
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14天
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“GPT of Medium”可以翻译为“中等水平的GPT”。这里的“GPT”通常指的是“Generative Pre-trained Transformer”（生成预训练Transformer），这是一种人工智能模型。而“of Medium”则表示该模型的性能或能力处于中等水平。
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:
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孢子条的位置：请参照附上的位置图。
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地点；位置
日期 --->
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观察期（天数）
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3
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10
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1
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签名。
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+ Ve = 观察到的生长现象
+ 阴性对照：___________
- Ve = 未观察到生长现象；
- 阳性对照：______________
结论：
分析员： 审核人：
日期：
附录-II
微生物生物学部门
高压灭菌器的验证
菌种：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子条（10条）6 cfu (Colony Forming Units)
生产日期：__________
有效期至：__________
标签声明（Label Claim）
条带的位置和编号：
条带批号：
**Medium**: 大豆酪蛋白消化培养基（Soyabean Casein Digest Medium, SCD） 批次；批号 不。
pH值：__________（7.3 ± 0.2）
培养温度：55 ± 2请提供需要翻译的英文术语/短语/句子。 C
灭菌：温度：_______ 请提供需要翻译的英文术语/短语/句子。 C
循环参数：保持时间：________分钟。
观察结果：
日期
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1由于“st”不是一个常见的英文术语或短语，在药学或技术领域的专业文献中也没有找到其明确的含义或用法。因此，我无法为您提供准确的翻译。如果您能提供更多的上下文或说明“st”的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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2nd
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3rd
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4由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的翻译词典中无法找到其对应的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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5由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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6由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。
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7由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的含义，因此无法提供准确的翻译。请提供更多的上下文或明确这个词的具体含义，以便我能够给出正确的翻译。
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8由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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9由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的翻译词典中无法找到其对应的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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10由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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11由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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12由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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13由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。
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14由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的含义，因此无法提供准确的翻译。请提供更多的上下文或明确这个词的具体含义，以便我能够给出正确的翻译。
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条码编号：无
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1
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3
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7
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签名；署名
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-ve = 无生长
阴性对照：_______
+ve = 生长
阳性对照：_______
评论：
签名：微生物学家
报告日期：
质量控制负责人的签名