无菌区
无菌操作规程用于保护眼科药品和注射用药品，防止微生物和颗粒污染。为了消除热原和有害的细菌产物，必须避免微生物污染。最终灭菌产品的制备（即在容器中密封后进行灭菌的产品）是在洁净区域内完成的；而非最终灭菌产品的制备则需要在无菌条件下使用无菌材料进行，或者通过过滤灭菌后再装入无菌包装中。在无菌区域内，所有无菌药品和产品都是在这里生产的。这个区域的设计、建造、使用和维护都至关重要，尤其是要保持其清洁，以控制和防止产品的任何微生物污染。相比之下，含有死微生物、微生物提取物或灭活病毒的活疫苗或减毒疫苗则放置在单独的区域中。在受控的环境中，可以避免复合无菌制剂（CSPs）的交叉污染。复合操作应在工程控制条件下进行，例如使用层流罩（LAFHs）、生物安全柜（BSCs）或复合无菌隔离室（CAI），以最大限度地降低污染相关风险。
设计无菌区域
每个生产阶段都由无菌生产单元独立完成。该单元还应保持安全、有序的工作流程，以减少人员在不同洁净区之间移动的需求。为了防止产品受到污染，该单元的布局和设备摆放都经过精心设计，确保产品不会受到任何污染。
设计与建造
清洁和无菌灌装设施仅允许授权人员进入。工作人员在进入房间前必须在更衣室更换洁净室专用制服。传递工作台在更衣室的不同更衣区之间提供了物理隔离屏障，使人员能够独立完成更衣流程。在物料通过气锁或舱口转移时，会采取特别措施确保清洁和无菌灌装区域的清洁度。为此，灭菌设备和入口处都配备了双门设计，以防止两扇门同时被打开。表面材料
洁净室的地面、墙壁和天花板等表面应当光滑、不透水且无损坏，以尽量减少受污染颗粒和微生物的释放与积聚。清洁剂和消毒剂不应损坏表面材料。由于天花板有涂层，污染物无法从上方渗透进去。为减少污染颗粒的积聚，应避免在洁净室内设置难以清洁的死角或凹槽；也就是说，需要覆盖墙壁与地面的接缝处。货架、边缘、橱柜和设备等设施应尽可能减少。窗户必须密封，不得开启，以防止污染物进入。服务
进入洁净室的液体和气体在进入工作区域之前必须经过过滤，以确保其清洁度与洁净室内的空气相当。为了便于清洁管道和风管，这些管道和风管应布置在易于清洁的位置。洁净室内不应安装其他固定装置，如配电箱和开关面板。在进行无菌操作时，洁净区域内不应有水槽或排水系统；整个洁净单元内都不应设置这些设施。水槽和排水系统的设计、位置及维护方式都应减少微生物污染的风险，因此它们配备了易于清洁的过滤器以及电加热消毒设备。在人员及物料的进出管理方面，建议设置有限数量的门和通道。为了方便员工的通行，入口门应具备自动关闭功能。对于气闸门、墙壁上的通道、穿墙式高压灭菌器以及干热灭菌器，必须安装锁具以防止两扇门同时被打开。所有门都应配备报警系统，当有多扇门被同时打开时能够发出警报。
层流设备（层流罩）
在进行无菌配制操作时，工作台（也称为层流罩或层流无菌罩）具有以下功能：- 无菌配制设施（即时配制区）
- 为防止室内空气进入工作区域，需保持工作区域内的空气持续向外流动。
- 该通风罩将空气从前部向外输送，以悬浮并消除工作人员带入工作场所的杂质。
高效颗粒空气（HEPA）过滤器对于层流洁净室（LAFH）来说至关重要。这种过滤器从房间内抽取空气，先通过预过滤器去除主要污染物（如绒毛、灰尘等），随后以恒定速度将空气单向（层流方式）通过洁净罩和HEPA过滤器，输送到关键区域（如无菌配制区）。HEPA过滤器能够捕捉空气中的颗粒物和细菌，同时允许气体通过。
应在洁净室的进气口或附近安装HEPA过滤器。通过在HEPA过滤器上游安装预过滤器，可以延长其使用寿命。此外，还安装了风扇来帮助空气流经过滤器。1S型HEPA过滤器使用的是折叠式玻璃纤维纸过滤介质。这种平行折叠的设计不仅增加了过滤器的表面积，还改善了空气的流通效果。过滤介质的这种平行排列方式使得过滤器的体积更小。
多层折叠过滤器的结构深度比传统的HEPA过滤器要浅。在过滤器内部，过滤材料被固定在铝制框架上。过滤器的其中一侧覆盖有一层保护涂层。 钢网HEPA过滤器具有以下优点：
- 高空气流速率
- 高颗粒容纳能力，以及
- 过滤器两端的压降较低。
类型
层流罩有两种类型——水平气流罩：这种罩子通过气流将过滤后的空气从后部向前部输送。房间内的空气首先通过一个预过滤器（类似于炉子用的过滤器）进行过滤，该过滤器由电动鼓风机驱动。预过滤器需要定期清洁和更换。空气经过预过滤器后（但不会被强制通过），然后被加速（但不会被加压），以确保均匀的气流分布能够到达位于工作区域后部的最终过滤器（HEPA过滤器）。
HEPA过滤器能够过滤掉99.97%直径大于0.3微米的颗粒物，从而有效清除空气中90%以上直径大于0.5微米的细菌和其他微生物。
垂直气流罩：这些罩子通过垂直方向输送过滤后的空气。经过 HEPA 过滤的空气在顶部混合后，向下流经工作区域。垂直气流罩的设计基于这样一个原则：即 HEPA 过滤器与制备药品的组件之间不应有任何空气流动的干扰。如果物体进入无菌区域（位于无菌部件和 HEPA 过滤器之间），可能会产生气流湍流，从而导致外来污染物转移到无菌表面上，进而可能污染注射器接口、针头或注射器本身。
水平气流罩应确保没有任何物质能够从无菌物体后方穿过；垂直气流罩则应防止任何物质从无菌物体上方穿过，从而保证绝对的无菌状态。然而，在配药工作区域内，各种物料会干扰来自高效颗粒空气过滤器（HEPA filter）的气流模式。
操作规程（Standard Operating Procedures, SOPs）
层流罩（LAFH）的运行遵循以下原则：- 为了防止空气污染，过滤器应放置在远离人流、门、通风口以及任何可能产生气流的物体的地方。
- 该设备应至少开启24小时；否则，未过滤的、非无菌的空气会充斥在配制工作区域内。因此，在再次使用之前，需要先开启设备30分钟进行消毒。除了清除工作区域内的非无菌空气外，该设备还可以用于通风。
- 在使用 LAFH（层流罩）之前，需用无绒布和70%异丙醇清洁其内部表面。为彻底清除杂质，清洁工作应从HEPA过滤器开始，然后从上到下、从前往后依次进行。
- 每次配制完成后，以及当工作表面变得不干净时，都应进行清洁。最初使用无菌水进行清洁，因为表面上的某些成分无法被酒精溶解（例如葡萄糖和氨基酸）。擦去水分后，再用酒精清洁表面。某些类型的层流柜（LAFH）中的有机玻璃内壁应使用温水和杀菌洗涤剂（如Lysol IC、Vesphene或LpH）进行清洁，而不是酒精。
- HEPA过滤网（防护格栅）需要定期清洁，以防止其受潮。
- 将所有用于无菌配制的物品放入洁净罩内。该区域内不得有任何纸张、笔、标签或托盘。
- HEPA过滤器不得接触清洁溶液、注射器抽取的液体或安瓿瓶的玻璃部分（开启安瓿瓶时不得朝向过滤器）。
- 在配制过程中，操作人员的手腕和手上不应佩戴任何首饰，因为这会破坏工作人员服装（工作服和手套）的完整性。
- 配药工作区域内，操作人员应避免聊天和咳嗽。
- 为了减少气流湍流，操作人员应避免或消除在层流罩（LAFH）内部或附近的不必要移动。
- 在无菌环境中，吸烟、进食、嚼口香糖和饮水都是严格禁止的。
- 这些物品应当放置得当，以便最大限度地利用层流空气。关键物品应靠近空气供应口。为了防止与过滤器直接接触，水平式洁净工作台内的物品不应放置在距离过滤器后部小于3英寸的位置。或者，可以按照从洁净工作台后部开始、逐层向上堆放的方式放置物品（例如，IVPB瓶）。此外，每层堆放的物品数量不应超过三到四个。
- 为避免污染，无菌操作应在距离操作罩侧面和前缘6英寸（约15厘米）的位置进行。
- 经过培训的人员应每6个月对主要工程控制设备（如层流罩（LAFHs）、生物安全柜（BSCs）和空气净化系统（CAIs）进行一次测试。当设备移动或过滤器损坏时，也需要进行测试。这些测试的目的是确保高效空气过滤器（HEPA filters）和气流速度处于正常工作状态。