1.0 目的
制定微生物实验室监测程序，以确定微生物负荷和非活性颗粒的性质和程度。2.0 范围
该规定适用于微生物实验室。3.0 责任
微生物学家4.0 责任制
部门主管5.0 程序/步骤
5.1 区域监控的运行前检查
5.1.1 应使用培养前已预培养两天（2天）的平板。5.1.2 检查平板上是否有任何微生物污染。 污染；杂质 以及固体培养基的物理完整性。
5.1.3 板材的外表面应使用经过过滤的杀菌剂进行消毒。
5.1.4 检查培养基的失效日期/使用期限。
5.1.5 检查需要放置平板的区域的清洁状态。
5.1.6 确保温度控制在...范围内。 湿度 以及 **压差** 是否在规定的范围内。
5.2 在区域监测过程中需采取的预防措施。
5.2.1 以能够避免人员干扰的方式暴露并收集培养皿。
5.2.2 以手指不接触培养基表面的方式打开盖子。
5.2.3 在暴露和收集培养皿时，不要倚靠在培养皿上。
微生物实验室的监测是通过以下方法进行的。
5.3 被动空气采样（沉降平板法）
5.3.1 按照规定准备大豆酪蛋白消化琼脂平板。 微生物培养基的储存和制备标准操作规程在预培养48小时后，使用准备好的培养板。5.3.2 将预定数量的预培养的培养皿转移到传递箱中。LAL测试 从培养箱到孵化器（from the incubator to the room for further development）。
5.3.3 按照标准操作规程（SOP）的要求进入相应的区域。
5.3.4 采用无菌方法检查预培养的平板，以确认是否存在任何……的迹象。 微生物污染.
5.3.5 废弃出现微生物生长的培养板。
5.3.6 使用浸有过滤后的杀菌剂的无菌拖把对外部培养皿表面进行消毒。
5.3.7 用记号笔在培养皿的底部标明以下详细信息：
对于阴性对照平板
|
对于所有其他的板子/样品/组件……
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媒体批次编号
|
地点名称
|
使用日期
|
取样日期
|
由……使用
|
由...取样
|
5.3.9 将培养基平板放置在所有指定位置，暴露于相应环境中4小时。
5.3.10 在暴露4小时后，盖上培养皿的盖子。
请按照培养板暴露的顺序收集这些培养板。
5.3.11 收集所有的培养皿，并将它们转移到培养箱中。
5.3.12 将所有暴露过的培养皿倒置放置在培养箱中，在22.5 ± 2.5°C下培养3天，在32.5 ± 2.5°C下培养2天。（每组培养皿堆叠时不得超过10个）。
5.3.13 每月一次（最好是在月初），将单独的一组培养板放入 cRABS 中，并在 32.5 ± 2.5°C 的条件下进行厌氧培养，培养时间为 3 天，具体操作需遵循相关规程。 厌氧罐操作标准操作规程.
**注意：** 对于厌氧培养，平板应在厌氧条件下预培养2天。
5.3.14 孵育完成后，使用计数器或在光源下借助标记物观察并统计菌落的数量。
5.3.15 请按照规定的格式记录下观察结果。
5.3.16 如果检测结果中的计数值超过了以下规定的限值 调查结果。 根据标准操作规程（SOP）采取必要的行动。
5.3.17 监控频率
A类：每天活动时使用一次。
B类：每天一次
C类：每天一次
D类：每周两次
请提供需要翻译的英文术语或短语，我将为您生成相应的简体中文翻译。 无菌检查 必须在同一时间进行；如果需要在一天内完成，那么所有的监测工作也必须在同一天完成。
5.3.18 接受标准
警戒限（Alert Limit）
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行动限（Action Limit）
|
A类：每平板1个菌落形成单位（CFU）
|
A类：每平板1个菌落形成单位（CFU）
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B类：每平板3个菌落形成单位（CFU）
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B类：每平板5个菌落形成单位（CFU）
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C类：每平板35个菌落形成单位（CFU）
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C类：每平板50个菌落形成单位（CFU）
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D级：每平板75个菌落形成单位（CFU）
|
D级：每平板100个菌落形成单位（CFU）
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5.4 活性空气采样
5.4.1 按照《微生物培养基储存与制备操作规程》（SOP）准备大豆酪蛋白消化琼脂平板。将制备好的平板在预培养48小时后使用。5.4.2 将所需数量的培养基盒、培养皿及配件转移到传递箱中（然后从传递箱送入 LAL 测试室和培养箱）。
5.4.3 按照标准操作规程（SOP）的要求进入相应的区域。
5.4.4 采用无菌方法检查预培养的平板，以确认是否存在微生物污染的迹象。
5.4.5 废弃出现微生物生长的培养板。
5.4.6 用过滤后的杀菌剂对培养基盒/平板的外表面进行消毒处理。
5.4.7 用记号笔在培养皿的底部标注以下详细信息：
对于阴性对照平板
|
对于所有其他的板子/样品/组件……
|
媒体批次编号
|
地点名称
|
使用日期
|
取样日期
|
由……使用
|
由……取样
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5.4.9 将介质盒/板放置在空气采样器上，并按照操作说明操作仪器。 空气采样器操作规程.
5.4.10 将仪器带到需要采集空气样本的位置，将其放置成平板朝向气流的方向，并确保其处于规定的工作高度。
5.4.11 在采样完成后，将所有培养皿收集起来，并以倒置的状态放入培养箱中培养：在22.5 ± 2.5°C的温度下培养3天，在32.5 ± 2.5°C的温度下培养2天。
5.4.12 孵育完成后，使用计数器或在光源下借助标记物观察并统计菌落的数量。
5.4.13 以规定的格式记录下观察结果。
5.4.14 如果检测结果超出以下规定的限度，应调查原因，并根据标准操作规程（SOP）采取必要的措施。
5.4.14 监控频率
A类：每天一次
B类：每天一次
C类：每天一次
5.4.15 接受标准
警戒限（Alert Limit）
|
行动限（Action Limit）
|
A类：每平板1个菌落形成单位（CFU）
|
A类：每平板1个菌落形成单位（CFU）
|
B类：每平板7个菌落形成单位（CFU）
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B类：每平板10个菌落形成单位（CFU）
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C级：每平板75个菌落形成单位（CFU）
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C级：每平板100个菌落形成单位（CFU）
|
注意：在活动完成后进行空气采样。
| |
5.5 按照标准操作规程（SOP）对污染物进行研究。
5.6 非活性微生物采样
5.6.1 进行非活性微生物采样。
5.6.2 按照标准操作规程（SOP）操作采样器。
5.6.3 取样应按照表格中的要求进行。
5.6.4 记录计数的详细信息。
5.6.5 在指定位置进行非活性微生物计数测试，每次运行持续1分钟。
S.no
|
房间编号/
设备编号
|
等级；类别；阶级
|
数量；数目 由于“L”本身不是一个常见的英文术语或短语，在制药行业的技术文档中也没有明确的含义或用法，因此无法提供准确的翻译。如果您能提供更多的上下文或说明“L”的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。**位置**
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验收标准（每立方英尺的颗粒数）
|
频率
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|
0.5 米 / 英尺3
|
5米/英尺3
|
|||||
1
|
1
|
A
|
2
|
100
|
≥ 1
|
每十五天一次
|
2
|
2
|
A
|
3
|
100
|
≥ 1
|
每天的；日常的
|
3
|
3
|
A
|
2
|
100
|
≥ 1
|
每十五天一次
|
4
|
4
|
B
|
2
|
10,000
|
57
|
每十五天一次
|
5
|
5
|
B
|
2
|
10,000
|
57
|
每十五天一次
|
6
|
6
|
B
|
4
|
10,000
|
57
|
每十五天一次
|
7
|
7
|
B
|
3
|
10,000
|
57
|
每十五天一次
|
8
|
8
|
C
|
3
|
100,000
|
571
|
每十五天一次
|
9
|
9
|
C
|
8
|
100,000
|
571
|
每十五天一次
|
10
|
10
|
D
|
3
|
未定义
|
未定义
|
每十五天一次
|
11
|
11
|
D
|
5
|
未定义
|
未定义
|
每十五天一次
|
12
|
12
|
D
|
3
|
未定义
|
未定义
|
每十五天一次
|
5.7 表面拭子检测
5.7.1 有关采样点的位置，请参考现场的位置图。5.7.2 准备生理盐水蛋白胨溶液，量取10毫升放入试管中，然后放入一根棉签。 使用高压灭菌器进行灭菌处理。 在15磅的压力下，于121°C的温度下保持15分钟。
5.7.3 用经过过滤的杀菌剂对生理盐水试管的外表面进行消毒，然后通过传递窗将试管转移到 cRABS（封闭式洁净空气屏障系统）中。
5.7.4 去除多余的溶液。 **拭子** 通过按压试管的侧面进行采样。使用平行且重叠的擦拭动作，同时缓慢旋转拭子，擦拭5厘米×5厘米的面积。然后以与原始擦拭方向垂直的角度重复该动作进行采样。取样完成后，将拭子棒重新放入生理盐水蛋白胨溶液中。按照采样计划收集样本。取样后，用记号笔标注拭子的位置和取样日期。
5.7.5 将试管送至质量控制实验室，使用涡旋器搅拌1分钟后，按照相关规程进行微生物负荷（Bioburden）检测。 膜过滤法 按照标准操作规程（SOP）执行。
5.7.6 将培养皿在22.5 ± 2.5°C下培养3天，然后在32.5 ± 2.5°C下培养2天，期间保持培养皿处于直立状态。
5.7.7 孵育完成后，使用菌落计数器或在光源下借助标记物观察菌落数量，并记录结果。
5.7.8 监控频率
活动完成后
5.7.9 接受标准
类别 行动限
A 1 CFU / 平板
B 5 CFU / 平板
5.8 人员的手指进行轻触操作，同时使用 cRABS 手套进行辅助操作。
5.8.1 按照标准操作规程（SOP）“微生物培养基的储存与制备程序”准备大豆酪蛋白消化琼脂平板。预培养48小时后使用这些制备好的平板。5.8.2 在进入无菌区域之前，使用经过过滤的杀菌剂对外面的培养皿进行擦拭，并在培养皿上标注操作人员的姓名、测试日期、LHFD（实验室负责人）和RHFD（区域负责人）的信息。
5.8.3 打开盖子，将左手指尖（LHFD）和右手指尖（RHFD）的印迹取下：具体操作是将手指和拇指放在琼脂表面。
5.8.4 将大豆酪蛋白消化琼脂培养基倒置放置，在22.5 ± 2.5°C下培养3天，然后在32.5 ± 2.5°C下培养2天。
5.8.5 孵育后，统计培养皿上的菌落数量。 菌落计数器 在光源下，借助标记工具进行操作，并将结果按照规定的格式记录下来。
5.8.6 在无菌操作完成后，如果需要进行cRABS（封闭式洁净空气屏障系统）内的操作，请先进行手部消毒。手套的编号应从左到右依次排列。
5.8.7 使用含有杀菌剂的过滤液从外部擦拭培养皿，并将培养皿存放在无菌cRABS（封闭式安全柜）的传递箱中。培养皿上应标明手套编号和测试日期。
5.8.8 首先从传递箱中取出手套，然后用打开的内门将培养箱内的其他培养皿取出，并再取出其他手套的样本。
5.8.9 将大豆酪蛋白消化琼脂培养基倒置放置，在22.5 ± 2.5°C下培养3天，然后在32.5 ± 2.5°C下培养2天。
5.8.10 孵育完成后，使用菌落计数器或在光源下借助标记物来计数菌落数量，并将结果按照规定的格式记录下来。
5.8.11 监控频率
活动完成后
5.8.12 接受标准
人员手指接触的范围/限制。
行动限：A类：1 CFU（菌落形成单位）/ 5根手指（用于表示极低的污染水平）
B类：5个菌落形成单位（CFU）/ 5根手指
5.9 人员工作服的接触板
5.9.1 按照《微生物培养基储存与制备操作规程》（SOP）准备大豆酪蛋白消化琼脂RODAC平板（用于微生物检测与计数）。将培养基倒入培养皿中。 RODAC plates 确保在固化后形成凸面；没有凸面的板不得用于监测。使用经过48小时预培养处理后的板子。5.9.2 使用浸有过滤后的杀菌剂的无绒无菌拖把，对培养皿的外表面进行消毒。
5.9.3 用记号笔在培养皿的底部标明以下详细信息：
对于阴性对照平板
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对于所有其他的板子/样品/组件……
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媒体批次编号
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地点名称
|
使用日期
|
取样日期
|
由...使用
|
由...取样
|
5.9.5 将所有平板和阴性对照平板倒置放置，在22.5 ± 2.5°C下培养3天，在32.5 ± 2.5°C下培养2天。
5.9.6 孵育完成后，使用菌落计数器或在光源下借助标记物观察并计数菌落数量。
5.9.7 记录下观察结果。
限值：行动限
B 5 CFU/平板
6.0 缩写词
6.1 标准操作规程（Standard Operating Procedure）6.2 °C - 摄氏度
6.3 CFU - 菌落形成单位
6.4 µ - 微米
6.5 LHFD - 左手手指轻触（一种非正式的身体接触动作）
6.6 RHFD - 右手手指轻触（一种非正式的身体接触动作）
6.7 RODAC - 微生物检测与计数