贝尔德帕克琼脂培养基（Baird Parker Agar Base）
规格；标准；说明书
根据药典要求，用于从多种样本中筛选葡萄球菌的固体选择性培养基 ISO标准.
配方（以克/升计）
**色氨酸（Tryptone）**
...................................................10,0
丙酮酸钠 ......................................10,0
甘氨酸
.....................................................12,0
肉提取物
................................................5,0
氯化锂
..........................................5.0
酵母提取物 ...............................................1.0
**琼脂**
.........................................................17,0
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将60克物质悬浮在950毫升的溶剂中。 蒸馏水让它浸泡一会儿，然后不断搅拌直至沸腾。 通过高压灭菌进行灭菌处理。 在121°C下加热15分钟；冷却至50°C后，加入50毫升的Egg’s Yolk Tellurite无菌乳液（参考编号06-026），然后进行均质化处理。 将培养基分装到平板中。制备完成后，培养基不得重新加热或再次进行灭菌处理。
描述
Baird Parker琼脂培养基特别推荐用于检测和计数食品及其他材料中的葡萄球菌，因为它能够有效区分产凝固酶的菌株。培养基中高浓度的锂、甘氨酸和丙酮酸通常可以抑制其他细菌的生长。锂和甘氨酸有助于促进葡萄球菌的生长。尽管该培养基具有高度选择性，但偶尔仍可能允许某些芽孢杆菌、酵母菌以及极少数变形杆菌的生长。通过添加50毫克/升的磺胺甲噁唑，可以抑制变形杆菌的生长。
碲酸盐和蛋黄的存在是必需的——它们必须在灭菌后添加到培养基中——这有助于区分可能具有致病性的葡萄球菌菌落。研究发现，凝固酶试验与培养基中出现的溶菌圈之间存在高度相关性，这种现象是由于葡萄球菌中的卵磷脂酶所致。另一方面，研究表明，几乎所有凝固酶阳性的葡萄球菌都能够还原碲酸盐，从而产生黑色菌落；而其他类型的葡萄球菌则不一定具备这种能力。
当使用 SCHARLAU MICROBIOLOGY 公司提供的无菌试剂以外的其他试剂时，可以通过添加 50 毫升无菌蛋黄和 10 毫升 1% 碲化钾溶液来配制完整的培养基。培养皿应在配制当天或 48 小时内使用，以避免沉淀区域的特征变得模糊不清。不含蛋黄或碲化钾的基础培养基非常稳定，因此可以反复使用（即多次熔化后仍可继续使用）。
技术；工艺；技巧
接种方法是将0.5毫升的样品用Drigalski环均匀涂布在每个培养板上（参考文献5-010）。在35°C下培养18-24小时后，选择那些呈黑色、有光泽、凸起且边缘整齐的菌落，这些菌落周围通常会有一圈透明区域。这些菌落可以初步鉴定为凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
在35°C条件下培养24小时后，呈现殖民状外观。
金黄色葡萄球菌：呈黑色、有光泽、凸起形状，边缘规则，直径为1.0-1.5毫米；周围有一圈宽2-5毫米的脂肪分解透明区。48小时后，可能会在透明区域内形成宽大的不透明沉淀带。
其他种类的葡萄球菌：黑色菌落，边缘通常清晰规则。有时菌落呈棕色，并伴有透明区域，但这些菌落会形成宽大的不透明圈。
**Micrococcus spp**: Brown in color, very small in size, and have an unclear shape.
**Bacillus spp.**：多种类型；颜色呈棕色或深棕色。在48小时后可能会出现透明化现象。
酵母：白色、体积较大且表面光滑。
蛋黄乳液可以通过将新鲜蛋黄与等体积（重量/体积比）的生理盐水混合来制备。经过过滤灭菌后，将其无菌地加入培养基中。这种试剂的参考编号是 SCHARLAU 6-016，该试剂本身已经过灭菌处理。
亚碲酸钾溶液的制备方法是将3.5克亚碲酸钾溶解在100毫升蒸馏水中，然后通过过滤进行灭菌处理。该无菌试剂的SCHARLAU微生物学参考编号为6-011。
尽管这些溶液可以混合后添加到Baird Parker琼脂培养基中，从而形成常见的“蛋黄碲化物无菌乳液”（参考文献06-026），但它们作为单独的补充剂也同样稳定，可以用于许多其他培养基中。
血琼脂培养基（哥伦比亚型）
规格；标准；说明书
含有丰富蛋白胨的培养基，适用于添加血液或制备巧克力琼脂培养基。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
........................................12,0
肉蛋白胨
...........................................11,0
淀粉
.........................................................1.5
氯化钠
.........................................5.0
琼脂
..........................................................15,0
最终pH值为7.3 ± 0.2
使用说明；用法用量
将44.5克粉末加入950毫升蒸馏水中，煮沸后将其分装到合适的容器中。 在121°C下进行灭菌处理。 将血液琼脂冷却至45-55°C，然后无菌地加入5%比例的无菌去纤维血液。
描述
血琼脂培养基（Blood Agar Base）含有肉膏和酪蛋白胨的平衡混合物，适合通过添加血液或抑制剂来制备选择性培养基和诊断培养基。如果不添加任何其他成分，它也是一种优秀的通用培养基。
通常，血琼脂培养基含有酪蛋白胨，有助于形成较大的菌落；或者含有肉胨，可以产生清晰的溶血环或溶血区。血琼脂培养基是根据哥伦比亚大学的配方制备的，同时满足上述两个要求。
技术；工艺；技巧
该基础材料的一些应用包括：
不含富集剂和抑制剂的基础琼脂培养基：该培养基支持正常微生物的生长，包括肠杆菌科细菌，以及一些更耐热的微生物，如巴氏杆菌（Pasteurella）、布鲁氏菌（Brucella）和产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）。
**选择性梭菌培养基：**
如果需要使用选择性梭菌培养基，应在灭菌前加入240 mg/L的叠氮化钠（Sodium Azide）和180 mg/L的新霉素（Neomycin）；或者也可以使用SC抑制剂容器（参考编号06-012CASE）中的成分。
**血琼脂培养基：**
无菌条件下，向无菌培养基中加入5%的无菌去纤维化羊血，并将其冷却至45°C。这样处理后，培养基的营养成分得到丰富，有助于观察典型的溶血反应，这些反应对于后续的实验分析是必要的。 肠球菌、葡萄球菌及其他微生物的鉴定.
选择性革兰氏阳性球菌血琼脂培养基：在加入血液的同时，还需加入10 mg/L的多粘菌素和15 mg/L的萘啶酸，或者加入CP抑制剂容器（参考编号06-013CASE）中的内容物，以获得一种适用于革兰氏阳性球菌的优良选择性培养基。
某些作者建议使用血琼脂培养基作为弯曲杆菌（Campylobacter）的维持培养基。
亮绿琼脂（Brilliant Green Agar，简称BGA）
规格；标准；说明书
根据《欧洲药典》的规定，这是用于分离沙门氏菌的培养基。
配方（以克/升计）
肉蛋白胨
.......................................5,0000
酪蛋白胨
....................................5,0000
氯化钠
....................................5,0000
酵母提取物
.........................................3,0000
乳糖 ...............................................10,0000
蔗糖
..............................................10,0000
苯酚红
...........................................0.0800
Brilliant Green
.......................................0.0125
琼脂 ....................................................15,000
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将53克粉末悬浮在1升蒸馏水中，不断搅拌至沸腾。然后分装到容器中，并在121°C下进行15分钟的灭菌处理。
描述
BGA是一种差异选择性培养基，能够检测不同样本中是否存在肠道致病菌。该培养基是对Kauffman原始配方的改进版本，同时符合ISO、HMO、Eur. Phar.、USP和APHA的相关标准。 规格；技术要求
由于该培养基含有高浓度的亮绿色色素，它能够显著抑制大多数细菌的生长，但沙门氏菌（Salmonella）除外。然而，伤寒沙门氏菌（S. typhi）和副伤寒沙门氏菌（S. paratyphi）也会被抑制。因此，当怀疑存在这些细菌或志贺氏菌（Shigella）时，建议同时使用其他培养基，例如脱氧胆酸盐乳糖琼脂（Deoxycholate Lactose Agar，参考文献01-057）、麦康凯琼脂（MacConkey Agar，参考文献01-118）、沙门氏菌-志贺氏菌琼脂（Salmonella Shigella Agar，参考文献01-171）、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸盐琼脂（Xylose Lysine Deoxycholate Agar，参考文献01-211或01-552）或内毒素琼脂基（Endo Agar Base，参考文献01-589），因为这些培养基的抑制作用较弱。
乳糖和蔗糖的存在有助于区分沙门氏菌（其菌落呈粉红色或无色，并带有红色晕圈或区域）与伴随存在的其他微生物群落（其菌落较小，呈黄绿色，并带有黄色晕圈）。这是因为乳糖和/或蔗糖的发酵产生了酸性物质。
Osborn和Stokes建议在培养基中添加0.08克/升的磺胺二甲嘧啶或1克/升的磺胺吡啶，以增强该培养基对沙门氏菌的选择性，并使其具备适合检测食品、鸡蛋及其衍生产品的特性。
缓冲蛋白胨水（pH 7.0的缓冲氯化钠-蛋白胨溶液）
规格；标准；说明书
根据《欧洲药典》和ISO 21149标准，用于样品均质化的稀释剂。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
....................................................1,00
氯化钠
........................................4,30
磷酸二钠
.................................7,23
磷酸钾...............................3,56
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将16克粉末溶解在1升蒸馏水中，必要时进行加热。根据需要稀释的食品类型，加入1至10毫升的聚山梨酯80（参考编号06-088）或聚山梨酯20。搅拌均匀后分装到容器中，然后在121ºC下高压灭菌15分钟。
描述
根据《欧洲药典》的建议，该溶液用于稀释样品以进行微生物检测。至于应使用哪种类型的乳化剂以及使用多少量，这需要由技术人员根据样品中的脂肪含量来决定。
酪蛋白卵磷脂聚山梨酯肉汤培养基
规格；标准；说明书
用于稀释和中和药品、化妆品、原材料或成品样品的液体介质，以便进行菌群计数。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
.....................................20,00
大豆卵磷脂
............................................5,00
最终pH值为7.3 ± 0.2
使用说明；用法用量
将25克粉末溶解在960毫升预先加热至50ºC的蒸馏水中，然后加入40毫升聚山梨酯20，搅拌均匀后分装到合适的容器中。最后在121ºC的高压灭菌器中灭菌15分钟。
描述
该制剂是按照《美国药典》的配方生产的。在《美国药典》的第<61>节“微生物限度检测”中，提出了一种替代方法用于中和（某些物质）。 防腐剂 在进行计数过程之前，必须先使用消毒剂对相关设备进行消毒，尤其是采用膜过滤方法时。
西曲米德琼脂（选择性假单胞菌琼脂）
规格；标准；说明书
根据 ISO 22717 标准制备的用于选择性分离铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的固体培养基。
配方（以克/升计）
明胶蛋白胨
........................................20.0
氯化镁 ...................................1.4
硫酸钾
.....................................10,0
**十六烷基三甲基溴化铵 ..........0.3**
琼脂
..........................................................15,0
最终pH值为7.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将46.7克粉末悬浮在1升蒸馏水中，然后加入10毫升甘油。煮沸后分装到合适的容器中，然后在121°C下灭菌15分钟。
描述
Cetrimide Agar培养基的原理是基于铜绿假单胞菌（Ps. aeruginosa）对季铵化合物（Quaternary Ammonium Compounds, QACs）的极强抗性。对于溴化十六烷基三甲基铵（Cetyltrimethyl-Ammonium Bromide），在浓度为1 g/L时确实能够促进细菌生长，但生长速度非常缓慢且不显著。
抑制剂浓度在0.3至0.5克/升之间时，似乎不会影响化脓性菌种的存活能力。然而，它确实能够抑制其他共存的苛养细菌。 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌以及其他种类的假单胞菌（Pseudomonas），这些细菌可能在较低的抑菌浓度下生长繁殖。
尽管铜绿假单胞菌（Ps. aeruginosa）在35°C下培养48小时后比其他任何难以处理的细菌更具优势，但建议首先在42°C下培养48小时进行分离。通过这种方法，可以几乎完全抑制其他微生物的生长。
Dey Engley 中和琼脂
参考文献 01-610
规格；标准；说明书
根据 ISO 22717 和 22718 标准，用于中和和检测消毒剂及杀菌剂的固体培养基。
配方（以克/升计）
**色氨酸**
...................................................5,00
酵母提取物
.............................................2,50
葡萄糖
.................................................10,00
卵磷脂
.....................................................7,00
硫代硫酸钠
.................................6,00
亚硫酸钠
........................................2,50
硫代甘氨酸钠
...............................1,00
聚山梨酯80
.........................................5,00
溴甲酚紫
....................................0.02
琼脂 ........................................................15,00
最终pH值为7.6 ± 0.2
使用说明；用法用量
将54克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后分装到合适的容器中，然后在121ºC的高压灭菌器中灭菌15分钟。出现沉淀是正常的，不会影响实验结果。
描述
Dey & Engley公司在1983年开发了这种培养基，用于恢复化学损伤的葡萄球菌。目前，它被广泛用于通过接触法（RODAC平板）来检测消毒剂的效力。 消毒剂 在防渗透的表面上使用。目前的配方包含了针对几乎所有用作消毒剂和杀菌剂的活性成分的中和物质。卵磷脂可以中和季铵化合物（QACs）；聚山梨酯可以中和酚类物质和甲醛；硫代甘醇酸可以中和有机汞化合物；硫代硫酸盐-亚硫酸盐可以中和卤素化合物；而卵磷脂与聚山梨酯的组合则可以中和乙醇及其他含酒精的化合物。
脱氧胆酸盐-柠檬酸盐琼脂
规格；标准；说明书
根据《欧洲药典》的规定，用于肠道致病菌的分离和选择性培养基。
配方（以克/升为单位）
**蛋白胨**
.................................................10,00
肉提取物 ............................................10,00
乳糖
...................................................10,00
柠檬酸铁
.............................................1,00
柠檬酸钠
........................................20,00
脱氧胆酸钠..............................
5,00
中性红
...............................................0.02
琼脂
........................................................15,00
最终pH值为7.3 ± 0.2
使用说明；用法用量
将71克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后立即倒入培养皿中。培养皿可以立即使用，或者冷藏保存几天。切勿进行高压灭菌或过度加热。
描述
欧洲药典中的这种配方是 Leifson 在 1935 年开发的 rhr 原始培养基的改良版本之一。其对革兰氏阳性微生物的抑制作用主要归因于其中所含的脱氧胆酸钠；尽管两种柠檬酸盐化合物也具有抑制作用。乳糖的存在有助于区分肠道细菌：能够发酵乳糖的细菌会产生酸，在中性红指示剂的作用下会形成红色菌落；而无法发酵乳糖的细菌则会形成无色菌落。菌落中心的黑色沉淀物（由硫化铁形成）可用于检测 SH2 的生成情况。
技术；工艺；方法
请尽快将样本直接接种到培养基表面。然后在35 ± 2ºC的温度下培养平板18-24小时。如果未观察到乳糖发酵现象，平板可以再培养24小时。
脱氧胆酸柠檬酸盐琼脂上的典型菌落形态如下：
大肠杆菌：
体型较大，呈扁平状，呈玫瑰红色。
肠杆菌属/克雷伯菌属：菌体较大，呈黏液状，颜色较淡，中心呈粉红色。
变形杆菌：体型较大，颜色从无色到棕褐色不等。
沙门氏菌：体型较大，颜色从无色到棕褐色不等。
志贺菌：无色至粉红色
铜绿假单胞菌：形态不规则，颜色从无色到棕色不等。
革兰氏阳性菌：无生长至轻微生长
葡萄糖琼脂
规格；标准；说明书
通用型固体培养基。
配方（以克/升计）
肉蛋白胨
.............................................5.0
酪蛋白胨
..........................................5.0
肉提取物
................................................3,0
D(+)葡萄糖
.............................................10,0
氯化钠
..........................................5.0
琼脂 ..........................................................15.0
最终pH值为6.9 ± 0.2
使用说明；用法用量
将43克粉末悬浮在1升蒸馏水中，加热至沸腾。然后在121°C下进行高压灭菌15分钟。如果需要酸性环境，可在培养基温度达到45°C时加入无菌酒石酸溶液。切勿重新加热。
描述
这种固体培养基适用于多种用途，能够支持大多数非苛养微生物的生长。向培养基中添加5%的无菌去纤维血后，它成为一种非常优秀的培养基，几乎可以满足所有微生物的营养需求，甚至包括脑膜炎球菌和肺炎球菌。然而，由于其高葡萄糖含量，它不适合用于溶血反应的研究。
差分强化梭菌培养基（Differential Reinforced Clostridial Medium，DRCM）
规格；标准；说明书
用于通过MPN（最可能数）法对食品样品及其他产品中的梭菌进行计数的液体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
................................................10,000
肉提取物 ............................................8,000
酵母提取物
...........................................1,000
淀粉
.....................................................1,000
葡萄糖
..................................................1,000
L-半胱氨酸盐酸盐
.......................................0.500
醋酸钠
......................................5,000
亚硫酸钠
......................................0.500
柠檬酸铁铵 .........................0.500
**Resazurine .............................................0.002**
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将27.5克粉末溶解在1升蒸馏水中，煮沸后分装到试管中，然后在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
描述
这种培养基是由 Freame 和 Fitzpatrick 对 Gibb 的经典培养基进行改良的版本，旨在便于检测能够还原亚硫酸盐的梭菌。主要的改良之处在于添加了亚硫酸氢钠和柠檬酸铁，这些成分能使菌落变成黑色，从而更易于观察。当前版本的培养基中不含有琼脂，以增强菌落的黑色效果。作为氧化还原指示剂的 Resazurine 可用于在同一检测过程中验证培养基中的厌氧环境。L-半胱氨酸在该培养基中起到还原剂的作用。
技术；工艺；技巧
待检测的样品按照MPN（微生物计数）技术要求被分装到试管中，并覆盖上石蜡或凡士林油以创造厌氧环境。这些试管被放入75°C的沸水浴中加热30分钟，以去除所有溶解的氧气和活性细胞。之后，在30°C下培养最多7天，只有在确认结果为阴性后才能得出最终结论。
通常，硫酸盐还原梭菌的孢子会在第二天到第四天之间萌发，培养基会变黑，此时测试结果为阳性。
通过添加70 IU/mL的硫酸多粘菌素，该培养基可以被调整为选择性培养基。
未接种的试管在以下条件下可以储存长达2周：即重氮紫条带没有出现过度氧化现象（氧化程度不超过柱高的1/3）。
该配方也符合用于冷冻食品研究的建议配方，同时也适用于果汁产品。在果汁产品的研究中，建议使用两份样品，其中一份需要经过酸化处理，以便有选择性地促进霉菌和酵母的生长。
通过在45°C下向已冷却的无菌培养基中加入7-8毫升10%的无菌酒石酸，可以很容易地实现酸化，使pH值降至3.5 ± 0.2。在这种条件下，切勿重新熔化培养基，因为这样会导致琼脂发生水解，从而无法再次固化。
EE培养基
规格；标准；说明书
根据 ISO 8523 标准，用于从食品样本中富集肠杆菌的液体培养基。
配方（以克/升计）
明胶蛋白胨
....................................10,000
葡萄糖
.................................................5,000
氧化胆汁
..................................................20,000
二钠磷酸盐
.............................6,450
磷酸一钾.............................2,000
亮绿色
.........................................0.015
最终pH值为7.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将43.5克粉末悬浮在1升蒸馏水中，然后在100°C下加热30分钟，之后立即冷却。
描述
顾名思义，这种培养基用于富集肠道细菌，是 Mossel（1963年）对经典的 Brilliant Green Bile 2% Broth（参考文献02-041）进行的改良。通过用葡萄糖替代乳糖，使其更适合检测食品和各种样本中的肠道细菌，无论是产气菌还是不产气菌。
常用的推荐方法如下：将待研究的样品以10%的比例加入无菌肉汤中。经过充分混合后，将混合物在35-37°C下培养18-20小时。之后，将混合物接种到适合分离选择性肠杆菌的固体培养基上。对于这一步骤，特别推荐使用紫红胆汁琼脂（参考文献01-164），不过也可以使用麦康凯培养基（参考文献01-118）、脱氧胆酸盐培养基或亮绿培养基。
从该培养基上怀疑存在的菌落中，可以按照常规方法进行鉴定。
伊红美蓝琼脂（Eosin Methylene Blue Agar，简称EMB Agar）
规格；标准；说明书
根据 ISO 21150 标准，用于从水中分离大肠菌群的选择性鉴别培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
................................................10,000
乳糖
.................................................10,000
磷酸二氢钾……2,000
黄红色伊红
......................................0.400
亚甲蓝
.......................................0.065
琼脂
......................................................15,000
最终pH值为7.1 ± 0.2
使用说明；用法用量
向1升蒸馏水中加入37.5克物质，煮沸后分装到合适的容器中。然后在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
描述
这是一种多功能培养基，最初开发用于区分大肠杆菌（E. coli）和产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）。它也被证明在快速鉴定白色念珠菌（Candida albicans）方面非常有效，并且与葡萄球菌的凝固酶检测结果具有高度相关性。
它已被多次推荐用于检测、计数和区分大肠菌群中的各种成员。
技术；工艺；方法
用于鉴定白色念珠菌（Candida albicans）的Weld方法使用含有氯四环素（100 mg/l）的培养基，并在10%二氧化碳（CO2）的环境中进行培养。该方法的有效性已通过多种样本进行了测试，包括痰液、口腔分泌物、粪便、指甲和阴道分泌物等，所有样本均在24-48小时内获得了明确的鉴定结果。葡萄球菌（Staphylococci）也容易被识别，尤其是凝固酶阳性的菌株。这些菌株具有非常典型的特征：小型无色菌落，中心有一个红色核心。
尽管如此，该技术的主要应用在于区分大肠杆菌（E. coli）和产气荚膜梭菌（E. aerogenes）。
培养基应在分配到每个含有20毫升制剂的试管中后进行灭菌处理，随后冷藏保存。使用前需将其置于沸水中溶解，并不断搅拌直至呈现深紫色。将溶解后的培养基倒入每个无菌培养皿中，待其凝固后使用。建议在使用前将培养基表面晾干，此时培养皿可以保持敞开状态。 **倒置的** 放在加热器上。
对于每一支含有可疑乳糖的肉汤培养管，用划线法接种到一个平板上，然后在37°C下培养24至48小时。之后进行检查。
大肠杆菌（Escherichia coli）和柠檬酸杆菌（Citrobacter）形成的菌落直径为2-3毫米，呈深紫色，菌落中心为黑色。当光线照射到这些菌落上时，会发出独特的绿色金属光泽。
肠杆菌（Enterobacter）和克雷伯菌（Klebsiella）形成的菌落呈凸圆形，其大小是大肠杆菌（E. coli）的两倍；这些菌落表面并不具有金属光泽，颜色为粉红色，中心部分为深蓝色。不能发酵乳糖的微生物则会产生无色的菌落。
在二氧化碳（CO2）环境中培养的白色念珠菌（Candida albicans）菌落具有非常独特的棉絮状外观，这使它们与其他产生典型酵母样菌落的念珠菌物种区分开来。
革兰氏阴性菌培养基（Gram Negative Broth，简称GN Broth）
规格；标准；说明书
根据Hajna的配方制备的用于肠道细菌的液体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨....................................................20.0**
葡萄糖
.....................................................1,0
D-甘露醇
..................................................2.0
柠檬酸钠
............................................5.0
脱氧胆酸钠.................................0.5
二磷酸二钾
.............................4.0
磷酸一钾
........................1.5
氯化钠
..........................................5.0
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将39克粉末溶解在1升蒸馏水中，分装到试管或烧瓶中，然后在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
描述
GN肉汤（革兰氏阴性菌肉汤）是一种用于富集和筛选肠杆菌的培养基。由于其含有高浓度的柠檬酸盐和脱氧胆酸盐，对革兰氏阳性菌具有很强的抑制作用。另一方面，甘露醇能够抑制变形杆菌（Proteus）的生长，同时促进沙门氏菌（Salmonella）和志贺氏菌（Shigella）的繁殖。
强烈推荐使用该培养基进行初步富集，富集时间应为14-16小时，之后再转至选择性培养基（如EMB培养基（参考文献01-068）或MacConkey培养基（参考文献01-118）中。该培养基的开发者Hajna指出，无论样品的来源如何，只要在接种前所有步骤都严格遵循运输培养基的使用要求，该培养基都能表现出卓越的选择性。
乳糖肉汤
规格；标准；说明书
根据 ISO 9308-2 和 21150 标准，用于牛奶和水中肠细菌及大肠菌群富集和检测的培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
......................................................5.0
肉提取物
................................................3,0
乳糖
.......................................................5.0
最终pH值为6.9 ± 0.2
使用说明；用法用量
将13克粉末加入1升蒸馏水中，或加入达到所需浓度所需的量。溶解后，将其分装到装有Durham管的容器中。然后在121°C下进行高压灭菌15分钟。避免再次加热。
描述
乳糖肉汤是一种经典的培养基，用于大肠菌群的初步检测以及沙门氏菌的富集培养。该培养基的配方符合美国公共卫生协会（APHA）、美国水协会（AWWA）、美国药典（USP-NF）和欧洲药典（European Pharmacopoeia）推荐的标准。
它通常与 Durham 发酵管一起使用，用于检测气体的产生情况。如果待接种样品的体积很重要，那么应在加入样品后，将培养基重新配制到适当的浓度，以确保其浓度仍保持在正常范围内。
尽管这不是原始配方，但这种培养基在45°C条件下进行埃克曼试验（Eijkman assay）时仍能表现出优异的气体生成效果，而这正是大肠杆菌（Escherichia coli）的特性。
在制备这种培养基时，需要注意避免其过热，并在灭菌前将其分装到试管中。
麦康凯琼脂（MacConkey Agar）
规格；标准；说明书
根据欧洲药典（EP）和ISO标准，这是一种用于检测、分离和计数多种样品中大肠菌群的选择性差分培养基。
配方（以克/升计）
蛋白胨 ................................................20,000
乳糖
.................................................10,000
胆盐 #3
...........................................1,500
氯化钠
......................................5,000
中性红
..............................................0.030
结晶紫
...........................................0.001
琼脂
......................................................15,000
最终pH值为7.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将51.5克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后放入高压灭菌器中，在121°C下灭菌15分钟。
麦康凯培养基（MacConkey Broth）
规格；标准；说明书
用于通过MPN（most probable number）法检测和计数大肠菌群的液体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
................................................20,000
乳糖
.................................................10,000
胆盐
................................................5,000
氯化钠
......................................5,000
中性红
............................................0.075
最终pH值为7.4 ± 0.2
使用说明；用法用量
将40克粉末溶解在1升蒸馏水中，煮沸后分装到装有Durham管的合适容器中，然后在121°C下进行高压灭菌15分钟。
甘露醇盐琼脂（Chapman琼脂）
规格；标准；说明书
用于分离葡萄球菌的选择性培养基
按照美国药典（USP）和国际标准化组织（ISO）的标准。
配方（以克/升计）
肉提取物
............................................1,000
酪蛋白胨 ......................................5,000
肉蛋白胨
.........................................5,000
氯化钠
....................................75,000
D-甘露醇
............................................10,000
苯酚红 ..............................................0.025
琼脂
......................................................15,000
最终pH值为7.4 ± 0.2
使用说明；用法用量
将111克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后分装到试管或烧瓶中，然后进行高压灭菌处理（121°C下灭菌15分钟）。
描述
甘露醇盐琼脂是一种经典的培养基，用于检测和计数葡萄球菌。该培养基由 Chapman 首次描述，并被许多官方机构采纳。后来人们对其进行了多种改良，这些改良版本的效力大致相似。
该培养基利用了葡萄球菌对高盐度的耐受性，将氯化钠作为选择性抑制剂——因为只有葡萄球菌和嗜盐性肠杆菌能够在这种高盐浓度下自由生长，而其他细菌则会被抑制。同时，该培养基还利用了葡萄球菌对甘露醇的代谢能力（即其致病性和发酵能力之间的关联）来进行初步诊断。当葡萄球菌发酵甘露醇并产生酸性产物时，酚红指示剂会变黄，在病原菌菌落周围形成黄色晕圈；而培养基的其余部分则保持橙色。
技术；工艺；技巧
建议进行大规模的表面接种处理，然后在37°C下培养36小时，或在32°C下培养3天。
经过正确的培养后，菌落的典型外观如下：
- **致病性葡萄球菌（凝固酶阳性）**表现为大菌落，并伴有黄色晕圈；
- **非致病性葡萄球菌（凝固酶阴性）**通常为小菌落，没有晕圈或颜色变化。
无论如何，必须通过经典方法检测凝固酶的存在。在获得液体培养基中的纯培养物后，才能确定其真正的致病潜力。
MRS琼脂
规格；标准；说明书
根据 de Man、Rogosa 和 Sharpe 的方法以及 ISO 标准 9332 和 15214 制备的乳酸菌固体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
...................................10,00
肉提取物
..............................................8,00
酵母提取物
.............................................4,00
D(+)葡萄糖
...........................................20,00
醋酸钠
........................................5,00
柠檬酸三铵 .................................2,00
柠檬酸三铵 .................................2,00
硫酸镁
...................................0.20
硫酸锰
...................................0.05
磷酸二钾............................2,00
聚山梨酯80
.........................................1,00
琼脂 ........................................................14,00
最终pH值为6.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将66克粉末悬浮在1升蒸馏水中。
用小火慢慢加热并轻轻搅拌，直至完全溶解。
分装到合适的容器中，然后置于121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
营养琼脂
规格；标准；说明书
根据ISO标准，适用于一般用途的固体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
......................................................5.0
肉提取物
................................................3,0
琼脂 ..........................................................15.0
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将23克粉末悬浮在1升蒸馏水中，加热至沸腾。然后分装到合适的容器中，并在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
营养培养基
规格；标准；说明书
根据ISO标准，用于培养非苛养微生物的液体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
......................................................5.0
肉提取物
................................................3,0
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将8克粉末溶解在1升蒸馏水中；仅在必要时加热。分装到合适的容器中，然后进行高压灭菌处理（121°C下加热15分钟）。
描述
营养肉汤（Nutrient Broth）是基于传统肉浸液培养基的现代化改良版本。它是一种简单的培养基，可用于多种通用目的（例如菌株的维持），同时也是其他专用培养基的基础。不过，实际上存在其他营养含量更高、性能更优的培养基。
营养肉汤（Nutrient Broth）是营养琼脂（Nutrient Agar）的液态形式，是一种经典的培养基，适用于培养非苛养性微生物。它非常适合用于普通细菌的传代培养，尤其是葡萄球菌（staphylococci），以便后续进行凝固酶（coagulase）等生化测试。此外，还可以按照美国农业化学协会（AOAC）推荐的技术和微生物种类，利用该培养基来测定酚系数（Phenol Coefficient）。
平板计数琼脂（Plate Count Agar，PCA）
规格；标准；说明书
根据 ISO 4833 和 17410 标准，用于表面接种法进行好氧菌平板计数的培养基（标准平板计数琼脂）。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
..........................................5.0
酵母提取物 ...............................................2.5
葡萄糖
.....................................................1,0
琼脂
..........................................................15,0
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将23.5克粉末悬浮在1升蒸馏水中，通过加热至沸腾并不断搅拌使其溶解。然后分装到最终容器中，并在121°C下进行15分钟的高压灭菌处理。
描述
平板计数琼脂的制备方法遵循 Buchbinder 等人在其研究中关于微生物平板计数培养基的指导说明。
为了避免添加牛奶成分，标准化的乳品微生物学培养基的配方已经进行了修改。这种新的配方能够在不添加任何其他物质的情况下促进大多数微生物的生长。
该培养基的配方与《乳制品检验标准方法》、美国药典（USP）中的“胰蛋白胨葡萄糖酵母琼脂”、德国农业部（Deutsche Landswirtchaft）的培养基配方，以及美国公共卫生协会（APHA）和美国农业化学协会（AOAC）的平板计数琼脂配方相同。目前，这种培养基被广泛用于各类样品的平板计数实验。
马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）
规格；标准；说明书
用于检测和计数食品中酵母和霉菌的固体培养基，特别推荐用于黄油及其他乳制品中。
配方（以克/升计）
马铃薯蛋白胨
.........................................4,00
葡萄糖
..................................................20,00
琼脂
........................................................15,00
最终pH值为5.6 ± 0.2
使用说明；用法用量
将39克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后分装到合适的容器中，然后在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。请勿过度加热。
描述
马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）由于其高糖含量和酸性pH值，对真菌的筛选作用较弱（即选择性较低）。马铃薯蛋白胨（potato peptone）有助于色素的产生以及菌丝在空气中的生长，尤其是在镰刀菌（Fusarium）、曲霉菌（Aspergillus）和青霉菌（Penicillium）等菌种中。
通过添加氯霉素或四环素等抗菌抗生素，或者简单地将pH值降低到酸性水平，可以提高选择性。在pH 3.5时，细菌生长几乎完全被抑制，而对真菌的影响则很小。这种酸化处理可以通过在灭菌后向培养基中无菌添加适量的有机酸来实现：通常添加10-15 mL/L的10% tartaric acid或lactic acid无菌溶液就足够了。
酸化后的培养基不应过度加热或重新加热，因为这会导致琼脂水解，从而影响培养基的固化性能。
技术；工艺；方法
将稀释后的样品分配到无菌培养皿中。将熔化并冷却至45-50°C的琼脂倒入培养皿中，轻轻搅拌使其均匀混合。待琼脂凝固后，将培养皿置于20-25°C的温度下培养5-7天，以使真菌菌落完全生长。
由于琼脂本身的酸性，导致其稠度较低，这种培养基不适合用于划线接种（即用于分离细菌菌落）。
R2A琼脂
规格；标准；说明书
用于检测处理过的水中异养微生物的固体培养基
配方（以克/升计）
酵母提取物
..........................................0.500
蛋白胨
...................................0.500
酪蛋白水解物
..................................0.500
葡萄糖
..................................................0.500
淀粉
.....................................................0.500
磷酸二氢钾 .............0.300
无水硫酸镁 ...............0.024
丙酮酸钠
......................................0.300
琼脂
......................................................15,000
最终pH值为7.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将18.1克粉末悬浮在1升蒸馏水中，不断搅拌直至沸腾。然后将其分装到合适的容器中，并在121ºC下进行高压灭菌15分钟。
描述
R2A琼脂是由Reasoner和Geldenreich在1979年提出的，几年后被美国公共卫生协会（APHA）采纳为一种替代培养基，用于培养处理过后的饮用水中的受压（即处于应激状态的）细胞。
使用富含营养的培养基（如PCA或TSA）可以促进正常微生物群的生长，但无法恢复那些受到压力或具有抗氯性的微生物群。通过使用低营养含量的培养基R2A，并结合较低的温度和更长的培养时间，有可能促使这些受损的微生物细胞重新恢复活性。
在R2A琼脂培养基中，氮源来自蛋白胨；酵母提取物提供维生素和生长因子。碳源是葡萄糖，硫酸镁和磷酸钾则用于维持渗透压。淀粉具有解毒作用，而丙酮酸钠有助于恢复受压细胞的活力。琼脂本身则起到凝固剂的作用。
技术；工艺；技巧
水样必须尽快进行处理。如果在6小时内无法完成处理，必须将样品冷藏，但冷藏时间不得超过30小时；否则，该样品将被拒绝接受。
R2A琼脂可用于倾注平板、划线平板或过滤法。需要注意的是，倾注平板法可能会因热冲击而影响培养基的回收能力。在35ºC下孵育3-5天是可行的，但20-28ºC、5-7天的孵育温度更为有效。无论如何，都必须防止平板过度干燥。
在这些培养条件下，快速生长或处于非压力状态的微生物会形成与在富营养培养基中不同的、更为微小的菌落。
拉帕波特-瓦西利亚迪斯培养基（Rappaport Vassiliadis Broth）
规格；标准；说明书
用于在食品及其他材料中选择性富集沙门氏菌的液体培养基。
配方（以克/升计）
大豆蛋白胨
...........................................4,500
氯化钠
......................................7,200
磷酸一钾 .....................1,260
磷酸二钾...........................0.180
氯化镁..............................13,580
孔雀石绿
......................................0.036
最终pH值为5.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将26.8克粉末溶解在1升蒸馏水中，如有必要可加热以帮助溶解。然后分装到试管或烧瓶中，并在121°C下进行高压灭菌15分钟。
描述
Rappaport Vassiliadis培养基符合美国公共卫生协会（APHA）关于食品检测的建议。
这种培养基是对 Rappaport 等人开发的 R10 培养基或 Vasiliadis 等人开发的 RV 培养基进行改良后的版本，由 van Schothort 和 Renaud 进行了改进。改进主要体现在调整了氯化镁的浓度，并对培养基的酸碱度进行了缓冲处理。该培养基对沙门氏菌（Salmonella）具有更高的选择性，在经过初步富集处理后，在 43°C 的培养温度下，其培养效果优于其他类似的培养基。
孔雀石绿和氯化镁能够抑制肠道中常见的微生物生长，但不会影响大多数沙门氏菌的繁殖。孔雀石绿还能抑制志贺菌的生长。大豆蛋白胨有助于沙门氏菌的生长。培养基的低pH值提高了这种抑制作用的选择性。
技术；工艺；技巧
将样品或材料从预富集培养物中接种到缓冲蛋白胨水中（参考编号02-277），然后在41±1°C下培养18至24小时。将培养得到的样品材料划线接种到选择性培养基上。
强化梭菌培养基
规格；标准；说明书
用于通过MPN法培养和计数梭菌的液体培养基。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
...........................................10,0
酵母提取物
...............................................3.0
肉提取物
...............................................10,0
葡萄糖
.....................................................5.0
氯化钠
..........................................5.0
醋酸钠
............................................3.0
可溶性淀粉
..............................................1,0
L-半胱氨酸盐酸盐
...........................................0.5
琼脂 ............................................................0.5
最终pH值为6.8 ± 0.2
使用说明；用法用量
将38克粉末悬浮在1升蒸馏水中，不断搅拌至沸腾。然后将其分装到合适的容器中，并在121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
描述
强化型梭菌琼脂（Reinforced Clostridial Agar）最初由 Hirsch 和 Grinstead 提出，目的是为了促进微量接种物的生长并提高梭菌的计数率。后来，Barnes 和 Ingram 使用这种培养基来培养产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）的繁殖细胞。Barnes 还利用该培养基对食品中的梭菌进行计数；此外，其他研究者也将其用于检测糖类中的嗜热解纤维梭菌（Cl. thermoscharolyticum）、研究肠道菌群以及人类或动物粪便中的细菌数量等实验。
对于通过MPN（微生物计数法）进行计数时，液体版本是更优选的方法。
技术；工艺；技巧
待检测的样品需在 Turmix 或 Stomacher 中研磨，然后制备一系列稀释液。从每种稀释液中取一定量样品接种到 Petri 平板或试管中，并在 50°C 下倒入熔化的培养基。待其凝固后，将平板或试管置于 30-55°C 的温度下培养 1-10 天（具体培养时间取决于预期存在的微生物种类）。如果使用试管，可在强化梭菌培养基凝固后立即覆盖密封厌氧琼脂（参考文献 01-174）以创造厌氧环境；如果使用平板，则需将其放入厌氧培养箱中进行培养。
Muñoa和Parés添加了一种经过灭菌处理的溶液，其中含有0.02克/升的萘啶酸、0.025克/升的多粘菌素、0.05克/升的硫酸卡那霉素、0.025克/升的碘乙酸钠以及0.025克/升的三苯基四唑盐酸盐，从而制备出一种专门用于检测水和废水中双歧杆菌的选择性培养基。
萨博劳德氯霉素琼脂（Sabouraud Chloramphenicol Agar）
规格；标准；说明书
用于分离真菌的固体培养基。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
...........................................5.0
肉蛋白胨
.............................................5.0
D(+) 葡萄糖
..............................................40,0
氯霉素
..........................................0.5
琼脂 ...........................................................15.0
最终pH值为5.6 ± 0.2
使用说明；用法用量
将65.5克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后分装到最终容器中，然后在121°C下进行15分钟的高压灭菌。请勿过度加热或重新加热该溶液，因为这会影响其固化过程。
描述
这种培养基与经典的Sabouraud琼脂的区别仅在于添加了氯霉素。氯霉素是一种耐热的抗生素，具有广谱抗菌作用，能够确保从高度污染的样本（如尿液、粪便、指甲和头发）中选择性分离出真菌。
沙氏葡萄糖琼脂（Sabouraud Dextrose Agar）
规格；标准；说明书
用于真菌计数和培养的培养基。
配方（以克/升计）
D(+) 葡萄糖
............................................40,0
酪蛋白胨
..........................................5.0
肉蛋白胨
.............................................5.0
琼脂
..........................................................15,0
最终pH值为5.6 ± 0.2
使用说明；用法用量
将65克物质溶解在1升蒸馏水中，并在不断搅拌的情况下煮沸。将溶液分装到最终容器中，然后使用高压灭菌器在121°C下灭菌15分钟。请勿过度加热该溶液，因为其酸性pH值可能会部分水解琼脂。或者，如果需要符合欧洲药典（Pharmacopoeia）的配方，在灭菌前加入50毫克/升的氯霉素（参考文献06-118CASE）。
描述
Sabouraud Dextrose Agar 是对经典 Sabouraud 培养基的改良版本，专为培养真菌而设计。这种新的配方有助于保持真菌的形态特征，从而实现可靠的培养和鉴别。
其选择性是由于较低的 pH 值和较高的葡萄糖浓度；这两个因素结合在相对较低的温度（25-30°C）下培养时，有利于真菌的生长，同时抑制细菌的生长。此外，这种蛋白胨的成分经过研究，能够满足真菌所有的氮源营养需求。
由于Sabouraud培养基中的强酸会部分水解琼脂，因此应仅制备所需的量，并且不应重新熔化该培养基。任何过热处理都会显著降低其凝胶能力。
如果需要更高的选择性，可以在灭菌后向熔融状态的培养基中添加多种抑制剂或选择性试剂。通过添加指示剂，还可以使培养基具有区分不同物质的能力。以下是一些最常用的抑制性和区分性混合物的示例：
青霉素：浓度为20,000单位/升时，通过抑制大多数细菌来增强培养基的选择性。
青霉素和链霉素的浓度分别为20,000 μg/L和40,000 μg/L时，有利于犬类中组织胞浆菌（Histoplasma）的分离培养。
青霉素和新霉素的浓度分别为20,000 u/L和40 mg/L，用于酵母的分离。
链霉素和氯霉素：浓度分别为40 mg/L和500 mg/L，用于分离疣状毛癣菌（Trichophyton verrucosum）。
多粘菌素、诺维博辛和环己酰亚胺：浓度分别为8 mg/L、0.1 mg/L和30 mg/L，用于分离白色念珠菌（Candida albicans）。
亚碲酸钾：浓度为150毫克/升时，用于从鳞屑和痂皮中初步分离真菌。
硫酸铜、结晶紫和亮绿：分别以500毫克、2毫克和5毫克的用量，能够显著抑制细菌生长。
三苯基四唑氯化物（TTC）：浓度为100 mg/L时，它是Pagano-Levin培养基的基础成分，用于分离白色念珠菌（Candida albicans）以及其他形成粉红色菌落的致病性酵母菌。
硒酸盐肉汤培养基
规格；标准；说明书
用于沙门氏菌和志贺氏菌富集的液体培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
....................................................5,00
乳糖
.....................................................4,00
磷酸钾.............................10,00
最终pH值为7.0 ± 0.2
使用说明；用法用量
将19克粉末溶解在1升蒸馏水中，然后加入4克亚硒酸钠（参考编号06-615）。搅拌均匀后煮沸，将溶液分装到合适的容器中。该培养基对热不稳定，需立即使用，切勿进行高压灭菌处理。
描述
硒酸盐培养基是根据Leifson的原始配方制备的，用于从严重污染的样本中选择性富集沙门氏菌（Salmonellae）。
富集操作在培养的最初12小时内特别有效，因为在这一阶段，只有沙门氏菌（Salmonellae）、某些变形杆菌（Proteus）和某些假单胞菌（Pseudomonas）容易生长。因此，建议不要延长富集阶段，而应尽快使用选择性培养基（无论是液体培养基还是固体培养基）。根据Bänffer的研究，如果在43°C下进行富集操作，培养基的效果会显著提高。如果在接种前培养基中出现红色沉淀物，说明培养基被过度加热了，这种情况下培养基的选择性会降低。
硫代甘氨酸肉汤（USP替代培养基）
规格；标准；说明书
用于无菌检查以及培养微需氧和厌氧微生物的培养基。特别适用于粘稠或浑浊的样品。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
...................................15,0
酵母提取物
...............................................5,0
葡萄糖
.....................................................5.5
氯化钠
..........................................2.5
硫代甘氨酸钠
...................................0.5
L-半胱氨酸
....................................................0.5
最终pH值为7.1 ± 0.2
使用说明；用法用量
将29克粉末溶解在1升蒸馏水中，必要时加热以促进溶解。然后将其分装到合适的容器中，并在121°C下进行15分钟的高压灭菌处理。这种培养基必须每次使用前都新鲜配制，或者在使用前先在100°C下加热10分钟。
描述
硫代葡萄糖酸盐培养基是一种标准培养基，也被称为替代型硫代葡萄糖酸盐培养基（Alternative Thioglycollate Medium）。该培养基由美国药典（USP）、国家食品标准局（NF）、美国国立卫生研究院（NIH）和食品药品监督管理局（FDA）共同制定并推荐使用。
它用于生物制品或外观浑浊的样品的无菌检测，当使用硫代甘油酸盐液体培养基（参考文献3-187）不合适时（由于其粘度原因）。
硫代甘氨酸肉汤的配方与不含重氮盐和琼脂的硫代甘氨酸 USP 流体培养基（Thioglycollate USP Fluid Medium）相同。
培养基必须新鲜配制，煮沸后进行灭菌处理，冷却后需在4小时内使用进行接种。
四硫代硫酸盐培养基
规格；标准；说明书
用于选择性富集沙门氏菌的培养基（AOAC方法，第17版，ICMSF 1968年；USP第25版）
配方（以克/升计）
肉蛋白胨
.............................................2.5
酪蛋白胨
..........................................2.5
胆盐
.....................................................1,0
碳酸钙
...................................10,0
硫代硫酸钠
...................................30,0
使用说明；用法用量
将46克粉末溶解在1升蒸馏水中，加热至沸腾后冷却至40-45°C。加入20毫升碘化物溶液以及2支Brilliant Green-Novobiocin选择性补充剂（参考编号06-017CASE），然后分装到无菌试管中。
加入碘溶液后请勿加热。培养基必须立即使用。如果没有加入碘溶液，培养基可以在冰箱中保存几天。培养基出现白色沉淀是正常的，这是因为其中含有碳酸钙。
描述
这是最初使用的版本，它对穆勒-考夫曼（Muller-Kauffmann）配方进行了修改或改进，因为后者具有更高的疗效。
三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar，简称TSI Agar）
规格；标准；说明书
根据ISO标准，用于鉴定肠杆菌的鉴别培养基。
配方（以克/升计）
**蛋白胨**
................................................20,000
肉提取物
............................................3,000
酵母提取物
...........................................3,000
乳糖
.................................................10,000
蔗糖
................................................10,000
葡萄糖
.................................................1,000
氯化钠
......................................5,000
柠檬酸铁铵 .........................0.500
硫代硫酸钠
..................................0.300
苯酚红
..............................................0.025
琼脂
.....................................................12,000
最终pH值为7.4 ± 0.2
使用说明；用法用量
将64.8克粉末溶解在1升蒸馏水中，然后煮沸。将溶液分装到试管中，并在121°C下灭菌15分钟。之后让溶液在试管中自然冷却至固化，确保试管口呈斜面且封口良好。
描述
TSI琼脂是对经典Kliger琼脂的改良版本。在该培养基中添加了1%的蔗糖，以便区分Proteus和Hafnia（蔗糖阳性菌）与Salmonella和Shigella（蔗糖阴性菌）。
通过指示剂（酚红）颜色的变化可以检测到糖的分解及酸的生成：当糖分解产生酸时，指示剂会从红色变为黄色；而当环境变碱性时，指示剂会变为紫色。如果只有葡萄糖被分解，产生的酸量较少，这些酸会在表面蒸发，导致指示剂重新氧化，从而使表面呈现碱性（红色），而底部呈现酸性（黄色）。当乳糖或蔗糖被分解时，产生的酸量较多，此时整个培养基（包括表面和内部）都会变成黄色。气体的产生可以通过培养基中气泡的形成以及琼脂表面偶尔出现的裂纹来检测到。
通过检测培养基与铁盐反应生成黑色FeS沉淀的方法，可以检测出由硫代硫酸盐或肽酮中的硫化氨基酸产生的硫化氢。
将培养基倒入倾斜角度适中（深度和倾斜度都合适）的试管中。接种时，可以在培养基表面划线或深入接种。建议使用带有棉塞的试管，以便指示剂能够重新氧化。如果使用螺旋盖，必须确保盖子是松开的。
以下是 TSI 球脂培养基中的观察结果及结果解读表格。
胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）（酪蛋白大豆消化琼脂）
规格；标准；说明书
根据 ISO 9308-1 标准制备的通用固体培养基，含有动物和植物蛋白胨。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
..........................................15,0
大豆蛋白胨
...............................................5.0
氯化钠
..........................................5.0
**琼脂**
......................................................... 15,0
最终pH值为7.3 ± 0.2
使用说明；用法用量
将40克粉末溶解在1升蒸馏水中，浸泡后煮沸以溶解琼脂。然后在121°C下进行高压灭菌15分钟。
描述
TSA（Tryptone Soy Agar）是一种广泛使用的培养基，其中含有两种胨类物质，能够支持多种微生物的生长，包括那些对培养条件要求极为苛刻的细菌，如奈瑟菌（Neisseria）、李斯特菌（Listeria）、布鲁氏菌（Brucella）等。由于其结果的可靠性和可重复性，TSA常被用于常规诊断测试中。
以下列表包含其一些最常见的应用：
1. 应采用 Kirbky-Bauer 方法或 WHO 指南进行敏感性测试。这两种方法均推荐使用 Mueller Hinton 球脂（参考文献 01-136）进行验证。
2. 该培养基在加入血液后，能够形成边界清晰的溶血区，同时由于其含有氯化钠，能够防止红细胞发生溶血。
3. 由于其丰富的胨类成分，这种培养基可以用来制备营养极其丰富的“巧克力”琼脂培养基。
4. 在还原性环境中或二氧化碳富集的条件下，这种培养基为分离布鲁氏菌（Brucella）和奈瑟菌（Neisseria）提供了极佳的培养条件。通过添加特定的添加剂，还可以使该培养基具有选择性。
5. 大多数链球菌在这种培养基中都能生长，不过不同种类的链球菌之间存在差异。
6. 胰蛋白酶大豆琼脂（Tryptic Soy Agar）是用于计数尿样细菌的选择性培养基，尽管最终的鉴别需要在选择性鉴别培养基上进行。
7. 在这种培养基中，通过添加适当的添加剂，可以进行多种用于区分和鉴定葡萄球菌的测试。
8. 酵母，尤其是念珠菌属（Candida）的菌种，可以在这种培养基中生长，并形成非常具有特征性的菌落。
9. 发色假单胞菌经常在TSA（琼脂糖扩散试验）培养基上产生色素沉着，因此很容易被识别。
10. 它被广泛用于检测受污染的样品。大量文献记录了其在食品工业中的应用。
11. 它在医疗行业中被广泛用于生产抗原、毒素等物质……
12. 其简单的成分且不含任何抑制剂，使其适用于检测食品和其他产品中的抗菌剂。
13. 这种培养基具有均衡的营养成分和高营养价值，同时不含可发酵的碳水化合物，因此被广泛推荐用于菌株的维护。
胰蛋白酶大豆肉汤（TSB）（酪蛋白大豆消化肉汤）
规格；标准；说明书
这是一种高营养含量的液体培养基，适用于多种通用目的，其配方符合美国药典（USP）、美国食品药品监督管理局（FDA）和欧洲药品管理局（EMA）的法规要求。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
..........................................17.0
大豆蛋白胨
.............................................3.0
氯化钠
..........................................5.0
磷酸二钾
................................2.5
葡萄糖
.....................................................2.5
最终pH值为7.3 ± 0.2
使用说明；用法用量
将30克粉末溶解在1升蒸馏水中，然后置于121°C的高压灭菌器中灭菌15分钟。
描述
胰蛋白酶大豆肉汤最初是为培养那些对环境要求极为苛刻的微生物而开发的，且在制备过程中不添加血清、血液或任何其他富集剂。
作为一种通用培养基，它能够支持大多数微生物的生长，包括需氧菌和兼性厌氧菌，即使这些微生物对生长条件要求较高。由于其富含维生素，布鲁氏菌（Brucella）、巴氏杆菌（Pasteurella）和链球菌（Streptococcus）的培养也非常适宜；此外，添加二氧化碳（CO2）的培养环境可以进一步促进它们的生长。
在厌氧条件下，这种培养基很容易滋生拟杆菌属（Bacteroides）和梭菌属（Clostridium）的细菌。为了达到最佳效果，可以添加0.3%的琼脂和0.05%的叠氮化钠（sodium azide）来抑制梭菌的生长。
胰酪大豆肉汤因其卓越的促生长特性，特别适合用于抗生素敏感性测试的试管稀释法。它在检测革兰氏阳性球菌方面也能取得良好的效果。该肉汤还可用于肺炎球菌的胆汁溶解性测试，以及过氧化氢酶和凝固酶试验的检测，并可用于制备高盐浓度的肉汤培养基。
这是制备细菌、霉菌和酵母中的抗原及毒素的理想介质。
TSB（Tryptone Soya Broth）被用作食品检测的主要富集培养基。在乳制品行业中，它被用于检测还原型雷沙嗪（resazurine）的存在。
该培养基不适合用于维持菌株的长期培养，因为碳水化合物的发酵会释放大量酸性物质，这些物质可能威胁到微生物的生存能力。虽然这种培养基可以支持链球菌和奈瑟菌的生长，但这些菌株在重复传代培养后往往会死亡。对于这类对环境要求较高的微生物，最好使用半胱氨酸胰蛋白胨液体培养基（Cystine Tryptone Fluid Medium, CTA，参考文献03-045）或胰蛋白胨肉汤培养基（Tryptone Soybean Agar Medium, TSA，参考文献01-200）进行培养。如果使用固体培养基不方便或不合适的话，也可以选择这些培养基。
尿素培养基
规格；标准；说明书
根据Rustigian和Stuart配方制备的液体诊断培养基。
配方（以克/升计）
磷酸一钾........................9.10
磷酸二钠
..................................9.50
酵母提取物
.............................................0.10
酚红
.................................................0.01
最终pH值为6.8 ± 0.2
使用说明；用法用量
将19克粉末溶解在950毫升蒸馏水中，然后在121°C下进行高压灭菌15分钟。冷却至50-55°C后，加入50毫升40%尿素无菌溶液（参考编号06-083），充分混合后分装到溶血管中（每管3.0毫升）。
描述
根据Rustigian和Stuart的研究，这种尿素培养基非常适合用于诊断肠杆菌科细菌，因为在肠杆菌科中，只有变形杆菌（Proteus）能够将培养基的pH值升高到8.1以上。尽管有些作者更倾向于使用其他方法或培养基……
缓冲区；缓冲剂 为了节省时间（大约2小时），将效力降低10倍或100倍以获得更快的结果，但这无法弥补培养基的不稳定性。
尿素酶的产生可以通过指示剂变为深粉色来观察，这是由于铵离子的强碱性作用所致。当接种量充足时（在3-5毫升培养基中加入2-3环菌种），变形杆菌（Proteus）会在6-8小时内导致颜色变化；而其他阳性肠杆菌则需要24-48小时才能产生同样的颜色变化。
紫红色胆汁葡萄糖琼脂
规格；标准；说明书
根据ISO 8523标准，用于肠杆菌计数的固体培养基。
配方（以克/升计）
酵母提取物
...........................................3,000
明胶蛋白胨
......................................7,000
胆盐 #3 ............................................1,500
D (+) 葡萄糖
.......................................10,000
氯化钠
......................................5,000
中性红
..............................................0.030
结晶紫 ...........................................0.002
琼脂
......................................................13,000
最终pH值为7.4 ± 0.2
使用说明；用法用量
将39.5克物质悬浮在1升蒸馏水中，让其浸泡。煮沸后，用高压灭菌器在121°C下灭菌15分钟。如果培养基在制备当天使用，则无需进行灭菌。但在恒温浴中长时间加热可能会导致轻微沉淀。
描述
该培养基是对Mossel等人描述的Violet Red Bile Agar（参考文献1-164）和MacConkey Agar（参考文献1-118）的改良版本。Mossel等人证明，在Violet Red Bile Agar中添加葡萄糖有助于促进最苛养的肠杆菌的生长，以及从不利环境中存活下来的菌株的回收。后来，Mossel本人发现，通过去除乳糖并保留葡萄糖，该培养基的效果仍然稳定。此外，这种方法还提高了经济效益，因为相同数量的材料可以配制出更多的培养基体积。
技术；工艺；方法
样品在乳糖肉汤（参考编号02-105）中按1:10的比例稀释，然后在35-37℃下孵育2-5小时。接着，将此预富集液在EE肉汤（参考编号02-064）中进一步稀释10倍，并在35-37℃下孵育18-24小时。之后，将富集液接种到多块VRBDL琼脂平板上。如果经过18-24小时的35-37℃孵育后，任何平板上都没有革兰氏阴性菌生长，则该产品通过测试。
在VRBDL琼脂培养基的表面，肠杆菌科（Enterobacteriaceae）的菌落呈深紫色，并且周围有一圈透明区域。有时还会出现少量的假单胞菌（Pseudomonas）或气单胞菌（Aeromonas）菌落，这些菌落可以通过氧化酶试验轻松区分开来。
沃格尔-约翰逊琼脂（Vogel Johnson Agar，简称VJ Agar）
规格；标准；说明书
根据 ISO 22718 标准，这是一种用于分离和鉴定葡萄球菌的固体且选择性极强的培养基。
配方（以克/升计）
酪蛋白胨
.......................................10,000
酵母提取物
...........................................5,000
甘露醇
.................................................10,000
磷酸二钾............................5,000
氯化锂
........................................5,000
甘氨酸
...................................................10,000
苯酚红
.............................................0.025
琼脂
......................................................15,000
最终pH值为7.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将60克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后分装到合适的容器中，然后在121°C下灭菌15分钟。冷却至约50°C后，无菌加入20毫升3.5%亚碲酸钾溶液（参考编号06-011）或60毫升1%亚碲酸钾溶液（参考编号06-089）。加入亚碲酸钾后不得重新加热。
描述
VJ琼脂是一种用于检测和计数致病性葡萄球菌的选择性培养基。
该介质的强选择性作用归因于其中所含的氯化锂、甘氨酸和亚碲酸钾。这些成分几乎可以抑制所有伴随存在的微生物，但不会影响葡萄球菌。虽然葡萄球菌可能会将亚碲酸钾还原为碲元素，不过锂的作用能够抵消这一影响，而甘氨酸则起到了关键的补偿作用。
此外，已经证明了亚碲酸盐还原与甘露醇发酵之间存在高度相关性；这一点通过培养基中的指示剂因产生的酸量而变黄得到了证实。
该培养基的特异性在最初的24小时内能够防止其他细菌的生长，因此允许进行大量接种。然而，在这个时间之后，可能会出现其他细菌，例如产生微小菌落的微球菌，以及能够发酵甘露醇且凝固酶阴性的葡萄球菌。因此，建议单独验证这一最后的测试结果。
由于碲酸盐的含量减少，葡萄球菌通常会在红色培养基上形成黑色菌落（如果它们不发酵甘露醇的话），或者在黄色培养基上形成黄色菌落（如果它们能发酵甘露醇的话，这些菌株被认为是潜在的病原体）。腐生性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和中间葡萄球菌）呈灰黑色，并且不能发酵甘露醇。完整的培养基可以在冰箱中保存长达1周。添加碲酸盐后，不要重新熔化培养基。
木糖-赖氨酸-脱氧胆酸盐琼脂（XLD琼脂）
规格；标准；说明书
根据 ISO 6340 标准，用于分离肠道病原菌（尤其是沙门氏菌）的固体培养基。
配方（以克/升计）
木糖
.......................................................3,50
L-赖氨酸
....................................................5,00
乳糖
.....................................................7,50
蔗糖
.....................................................7,50
氯化钠
.........................................5,00
酵母提取物
.............................................3,00
酚红
.................................................0.08
脱氧胆酸钠 ............................................. 2.50
硫代硫酸钠
......................................6,80
柠檬酸铁铵..............................0.80
琼脂
........................................................15,00
最终pH值为7.4 ± 0.2
使用说明；用法用量
将56.68克粉末悬浮在1升蒸馏水中。
不断搅拌并加热至沸腾，然后立即将其倒入培养皿中。
切勿进行高压灭菌处理，同时避免重新熔化。
描述
木糖-赖氨酸-脱氧胆酸盐琼脂（Xylose Lysine Deoxycholate Agar）是一种鉴别培养基，具有轻微的选择性，特别适合检测致病性肠杆菌，尤其是志贺菌（Shigella）。由于培养基中脱氧胆酸盐的含量较低，革兰氏阴性菌的生长会受到抑制，但志贺菌在这种培养基中的生长速度比在其他选择性培养基中更快。
木糖、乳糖或蔗糖的发酵会导致培养基酸化，这一现象可以通过指示剂变黄来观察，黄色会围绕菌落显现。这种颜色会在24小时后消失，因此观察必须在18到20小时之间进行。
从硫硫酸盐中产生的硫化氢很容易被检测出来，因为菌落会因为硫化铁的沉淀而变暗。在培养基中还可以观察到赖氨酸脱羧生成尸胺的过程，这一过程会导致培养基碱化，从而使指示剂变为红色。
所有这些反应都能有效区分志贺菌（Shigella）。除了埃德沃德氏菌（Edwardsiella）和普罗特乌斯不恒定菌（Proteus inconstans）之外，这些菌是唯一不能发酵木糖的肠杆菌科细菌，因此它们的发酵反应结果为阴性。沙门氏菌（Salmonella）能够发酵木糖，但由于木糖被迅速消耗，随后由于赖氨酸脱羧作用导致培养基碱化，可能会掩盖这一发酵现象。志贺菌与沙门氏菌的区别在于：沙门氏菌的菌落会因亚铁硫化物的沉淀而变暗，这一现象在埃德沃德氏菌中也很常见。其他类型的肠杆菌科细菌则不会出现这种情况，因为它们通过发酵乳糖和蔗糖产生的酸积累量非常大，足以防止pH值回升；即使在最初的24小时内，也不会形成亚铁硫化物沉淀。
下表描述了在37°C下培养24-36小时后，XLD培养基上典型的菌落形态。
酵母提取物琼脂
规格；标准；说明书
用于从水中计数微生物的固体培养基。
配方（以克/升计）
**色氨酸**
......................................................5.0
酵母提取物
................................................3.0
**琼脂**
...........................................................15,0
最终pH值为7.2 ± 0.2
使用说明；用法用量
将23克粉末悬浮在1升蒸馏水中，煮沸后分装到合适的容器中，然后在121ºC下进行高压灭菌15分钟。
描述
这种培养基是根据 Windle Taylor 的配方制备的，在英国被广泛用于水样中异养微生物的计数。需要通过在不同温度（35ºC 和 20ºC）下进行差异培养后，根据微生物的形态特征来区分细菌、酵母菌和丝状真菌。
技术；工艺；技巧
从水样中制备一个十进制稀释系列，使用Ringer溶液（参考编号06-073），然后分取样品至两个平行的培养皿中。倒入熔化并冷却至45ºC的酵母提取物琼脂，并与样品混合均匀。待琼脂固化后，将其中一个系列在35ºC下培养24小时，另一个系列在20ºC下培养3天。
为了获得准确的计数结果，应选择菌落数在30到300之间的平板。