尺寸排阻色谱（Size-exclusion chromatography）是一种根据分子大小对溶液中分子进行分离的技术。该技术基于溶质分子在溶剂与色谱柱之间的反复交换过程。 流动相 以及相同的溶剂在柱填料（stationary phase）的孔隙中的静止液相（liquid phase）中。填料材料的孔径范围决定了能够发生分离的分子大小范围。
足够小的分子能够穿透所有孔隙空间，并在总渗透体积（V_total）时被洗脱出来；而明显大于填充材料最大孔径的分子则只能沿着填充材料颗粒之间的空隙移动，不会被截留，从而在排除体积（V_exclusion，即填充材料内部的空隙体积）时被洗脱。根据分子大小的分离过程发生在排除体积和总渗透体积之间，有效的分离效果主要体现在这个范围的前三分之二区域内。
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设备；仪器
A 色谱柱如果需要，色谱柱应在温度受控的环境中操作；柱内填充能够分离不同分子大小的物质（即具有分离功能的填料），并且洗脱液应以恒定速率流过该填料。色谱柱的尺寸在相应的专论中有明确说明（长度×内径）。流动相可以通过重力或泵的作用流入色谱柱。色谱柱的出口连接到检测器上，该检测器配备有自动记录装置，可以实时监测样品中各组分的相对浓度。
检测器通常基于光度、折射率或发光特性来工作。自动分馏收集器（automatic fraction-collector）可能会被使用。 附件： 如需要的话。
检测器通常基于光度、折射率或发光特性来工作。自动分馏收集器（automatic fraction-collector）可能会被使用。 附件： 如需要的话。
包装材料可以是柔软的支撑物，例如膨胀凝胶；也可以是坚硬的支撑物，如玻璃、硅胶或与溶剂兼容的交联有机聚合物。坚硬的支撑物通常需要加压系统，以实现更快的分离速度。
在进行分离操作之前，包装材料会按照相关专论中的描述或制造商的说明进行预处理，然后按照专论中的要求对色谱柱进行装填。如果色谱柱的温度不同于室温，那么色谱柱的温度、包装材料的性质、流动相的组成和流速以及检测方法都应在相应的专论中明确说明。
性能；表现；功效
在专论中提到的分配系数（KD）是根据以下公式计算得出的：
KD = (VR - VO) /VT-
VR、V0 和 VT 的数值必须使用相同的计量单位来表示。
相对组分组成的测定
如果被检测样品中的所有成分对检测器的响应都相同，那么可以通过将每个成分的峰面积除以所有相关成分的峰面积之和来确定每个成分的相对含量。如果响应不同，则需要根据专论中规定的校准标准得到的校准曲线，或者通过其他方法来计算各成分的相对组成。
分子量的测定
按照各专论中提供的程序，对受试物质和校准标准进行实验。将标准品的保留体积与分子量的对数绘制在图表上。在该排除范围和总渗透范围内，曲线几乎呈直线。可以根据校准曲线估算出目标组分的分子量。该校准结果仅适用于在指定实验条件下使用的特定系统。
材料；原料
**琼脂糖Fe**：用于分离分子量为6×10^6的蛋白质。4 翻译结果：
达到2×10的水平。7 以及分子量为 3×10^9 的多糖类物质。3 翻译结果：
达到5×10的量级。6它们以直径为60至140微米的肿胀珠状颗粒形式存在，并可作为4%的悬浮液使用。 水。
**交联琼脂糖（Agarose FC）**：这种材料是通过琼脂糖与2,3-二溴-L-丙醇在强碱性条件下反应制备而成的。它主要用于分离分子量为6×10^4至10^7道尔顿的蛋白质。4 翻译结果：
达到2×10的水平。6 以及与琼脂糖Fe具有相同分子量范围的多糖。
硅胶Fe。用于分离分子量为1x10的蛋白质。3 翻译结果：
达到3×10的量级。5它是一种颗粒非常细小的粉末，平均粒径约为10飞米（f.u.），表面具有很强的亲水性，平均孔径约为30纳米（nm）。这种粉末可以与pH值为2到8的水溶液以及有机溶剂兼容。