**注意：**抗菌防腐剂的有效性测试应在药品制备的研发阶段以及商业化生产过程中进行验证。该测试并非用于日常质量控制目的。
在药品的开发过程中，必须确定抗菌防腐剂单独使用或必要时与适当防腐剂联合使用时的有效性。添加防腐剂的主要目的是为了确保药品的质量和安全性。 抗菌防腐剂 调整制剂的形式是为了防止因某些因素引起的不良反应。 污染；杂质 这些污染物可能是在生产过程中或之后无意中引入的微生物所造成的。
在药品的开发过程中，必须确定抗菌防腐剂单独使用或必要时与适当防腐剂联合使用时的有效性。添加防腐剂的主要目的是为了确保药品的质量和安全性。 抗菌防腐剂 调整制剂的形式是为了防止因某些因素引起的不良反应。 污染；杂质 这些污染物可能是在生产过程中或之后无意中引入的微生物所造成的。
然而，抗菌剂不应仅仅用于减少微生物数量，以此来替代良好的生产管理程序。在某些情况下，可能需要使用防腐系统来防止那些不需要达到无菌标准的制剂中的微生物繁殖。应当认识到，死微生物或其代谢产物的存在可能会在敏感人群中引起不良反应。
必须证明该抗菌剂在多种剂量下的有效性。 **parenteral** **释义：** “Parenteral” 是一个医学术语，指通过非肠道途径（如静脉注射、肌肉注射等）给药的方法或药物。这类药物通常不能被胃肠道吸收，因此需要直接注入血液循环系统。 **应用场景：** 常用于描述需要快速生效或不能通过口服途径给药的药物，例如抗生素、激素、某些疫苗等。这些用于耳部、鼻腔、眼部、口腔和皮肤的制剂采用水基或溶剂作为载体。需要验证所添加的任何防腐剂的有效性，并确保在产品的有效期内，其抗菌活性不会因储存而受到损害。这些测试仅适用于制造商提供的原始未开封容器中的产品。
该测试包括将制剂放入最终容器中，并加入规定数量的适宜微生物；将接种后的产品储存在规定的温度下；在指定的时间间隔从容器中取样，并计算取样中的微生物数量。如果在该测试条件下，经过规定的储存时间和温度后，接种制剂中的微生物数量显著减少或没有增加，则认为该产品的防腐性能是合格的。
用于测试的微生物应能够代表在制剂生产、储存和使用环境中可能存在的微生物。然而，还应补充其他菌株或物种，尤其是那些在特定产品制造或使用条件下可能存在的微生物，或者那些可能对所测试产品类型构成特殊挑战的微生物。在整个测试过程中，应始终使用单一菌株进行挑战（而不是混合培养物）。
白色念珠菌，ATCC 10231
黑曲霉 ATCC 16404
大肠杆菌 ATCC 8739
铜绿假单胞菌 ATCC 9027
金黄色葡萄球菌 ATCC 6538
*使用的是鲁氏接合酵母（Zygosccharomyces rouxii）NCYC 381，而不是白色念珠菌（Candida albicans）；*
为了防止所使用的菌株发生任何表型变化，试验中使用的微生物不应从原始培养物中传代超过5次。其中，一次传代是指将微生物从现有培养物接种到新鲜培养基中并使其生长。
**注意：** 所有用于测试的培养基都应进行促生长性检测。
每种测试制剂中活菌的初始浓度是根据标准接种物中微生物的浓度估算的，这些浓度是通过倾注平板法或膜过滤法测定的。将接种后的容器在室温下培养。在接种后7天、14天和28天，使用平板计数法测定活菌数。记录这些时间点上观察到的任何外观变化。根据测试开始时每毫升中的菌落形成单位（cfu）计算浓度，计算每个微生物在指定测试时间点的每毫升菌落形成单位减少的百分比，并以初始浓度的百分比来表示这些变化。
i) 对于注射剂、眼科制剂、无菌鼻用制剂和眼用制剂：
(a) 在7天时，存活细菌的浓度不超过初始浓度的10%；在14天时，不超过初始浓度的0.1%；到28天时，细菌数量进一步减少。
(b) 在初始计数后的第7天、第14天和第28天，酵母和霉菌的数量都没有增加。
ii) 对于以水为基础制成的外用制剂、非无菌鼻用制剂以及应用于黏膜的乳剂： (a) 在14天后，活菌浓度不得超过初始浓度的1%；并且在28天后，菌落数量应进一步减少。 (b) 在14天和28天时，酵母和霉菌的数量不应比初始数量有所增加。
iii) 对于口服制剂： (a) 在14天时，活细菌的浓度不得超过初始浓度的10%，并且在28天时数量进一步减少。 (b) 在14天和28天时，酵母和霉菌的数量与初始数量相比没有增加。
必须证明该抗菌剂在多种剂量下的有效性。 **parenteral** **释义：** “Parenteral” 是一个医学术语，指通过非肠道途径（如静脉注射、肌肉注射等）给药的方法或药物。这类药物通常不能被胃肠道吸收，因此需要直接注入血液循环系统。 **应用场景：** 常用于描述需要快速生效或不能通过口服途径给药的药物，例如抗生素、激素、某些疫苗等。这些用于耳部、鼻腔、眼部、口腔和皮肤的制剂采用水基或溶剂作为载体。需要验证所添加的任何防腐剂的有效性，并确保在产品的有效期内，其抗菌活性不会因储存而受到损害。这些测试仅适用于制造商提供的原始未开封容器中的产品。
该测试包括将制剂放入最终容器中，并加入规定数量的适宜微生物；将接种后的产品储存在规定的温度下；在指定的时间间隔从容器中取样，并计算取样中的微生物数量。如果在该测试条件下，经过规定的储存时间和温度后，接种制剂中的微生物数量显著减少或没有增加，则认为该产品的防腐性能是合格的。
用于测试的微生物应能够代表在制剂生产、储存和使用环境中可能存在的微生物。然而，还应补充其他菌株或物种，尤其是那些在特定产品制造或使用条件下可能存在的微生物，或者那些可能对所测试产品类型构成特殊挑战的微生物。在整个测试过程中，应始终使用单一菌株进行挑战（而不是混合培养物）。
注意事项
挑战测试应在能够防止测试过程中产品被意外污染的条件下进行；然而，为防止污染而采取的预防措施不应影响微生物的存活。 被检测的产品。测试用菌株/微生物
以下测试微生物被用于该测试中。白色念珠菌，ATCC 10231
黑曲霉 ATCC 16404
大肠杆菌 ATCC 8739
铜绿假单胞菌 ATCC 9027
金黄色葡萄球菌 ATCC 6538
*使用的是鲁氏接合酵母（Zygosccharomyces rouxii）NCYC 381，而不是白色念珠菌（Candida albicans）；*
为了防止所使用的菌株发生任何表型变化，试验中使用的微生物不应从原始培养物中传代超过5次。其中，一次传代是指将微生物从现有培养物接种到新鲜培养基中并使其生长。
**注意：** 所有用于测试的培养基都应进行促生长性检测。
接种液的制备：
将每种细菌分别接种在酪蛋白大豆消化琼脂培养基上，并在30°至35°的温度下培养8至24小时。将白色念珠菌（Candida albicans）接种在沙氏葡萄糖琼脂（Sabouraud dextrose agar）上，在20°至25°的温度下培养至少48小时。将黑曲霉（Aspergillus niger）接种在沙氏葡萄糖琼脂上，在20°至25°的温度下培养5至7天。培养结束后，收集各菌株的菌体，并分别重新悬浮于无菌溶液中，以测定其微生物数量。 由于 "lx" 并不是一个常见的英文术语或短语，在制药行业的专业术语中也没有找到对应的中文翻译。它可能是某个特定上下文中的缩写、代码或专有名词。如果您能提供更多的上下文信息或明确它的含义，我将能够给出更准确的翻译。108 每毫升含多少菌落形成单位（cfu）：可以在盐水中加入0.05%的聚山梨酯80来悬浮黑曲霉（Aspergillus niger）的孢子。应在2-4小时内使用这些微生物的悬浮液。该悬浮液可在4°至8°的温度下保存经过验证的时长。立即从每个悬浮液中取出适当样本，并通过倾注平板法或过滤法测定每毫升中的菌落形成单位数量。该数值用于确定接种浓度以及测试中使用的基准值。程序；步骤；操作规程
如果每个容器中有足够的样品体积（至少20毫升），并且该容器可以进行无菌接种，那么可以在五个原始容器中进行测试。如果填充体积不足，或者容器无法进行无菌接种，则需要将每个容器中的样品转移到五个合适的无菌容器中（每个容器至少20毫升）。使用准备好的标准化接种物对每个容器进行接种，确保接种后的微生物浓度在每毫升1×10^5到1×10^6个菌落形成单位（cfu）之间，并且接种物的体积不超过样品体积的1%。每种测试制剂中活菌的初始浓度是根据标准接种物中微生物的浓度估算的，这些浓度是通过倾注平板法或膜过滤法测定的。将接种后的容器在室温下培养。在接种后7天、14天和28天，使用平板计数法测定活菌数。记录这些时间点上观察到的任何外观变化。根据测试开始时每毫升中的菌落形成单位（cfu）计算浓度，计算每个微生物在指定测试时间点的每毫升菌落形成单位减少的百分比，并以初始浓度的百分比来表示这些变化。
解释；解读；说明
如果满足以下条件，这些防腐剂被认为是有效的：i) 对于注射剂、眼科制剂、无菌鼻用制剂和眼用制剂：
(a) 在7天时，存活细菌的浓度不超过初始浓度的10%；在14天时，不超过初始浓度的0.1%；到28天时，细菌数量进一步减少。
(b) 在初始计数后的第7天、第14天和第28天，酵母和霉菌的数量都没有增加。
ii) 对于以水为基础制成的外用制剂、非无菌鼻用制剂以及应用于黏膜的乳剂： (a) 在14天后，活菌浓度不得超过初始浓度的1%；并且在28天后，菌落数量应进一步减少。 (b) 在14天和28天时，酵母和霉菌的数量不应比初始数量有所增加。
iii) 对于口服制剂： (a) 在14天时，活细菌的浓度不得超过初始浓度的10%，并且在28天时数量进一步减少。 (b) 在14天和28天时，酵母和霉菌的数量与初始数量相比没有增加。