1.0 目标
制定培养物稀释液的制备程序。2.0 范围
本标准操作规程(SOP)适用于质量控制部门。3.0 责任
微生物学家。4.0 责任制
质量控制部门负责人。5.0 程序/步骤
5.1 连续稀释
5.1.1 为了从每周转移的工作菌种中制备合适的微生物菌株…… **文化倾向**将一环培养物接种到10毫升的SCDB培养基中,用于细菌和真菌的培养。5.1.2 将细菌悬浮液在32.5 ± 2.5°C下培养24至48小时,将真菌悬浮液在22.5 ± 2.5°C下培养24至72小时,以进行富集。
5.1.3 将富集后的悬浮液按1:10的比例在0.9%无菌盐水中进行系列稀释,每次稀释后充分混合,直至每毫升溶液中的菌落数达到10至100个CFU(菌落形成单位)。
5.1.4 从上述制备的稀释液中取1毫升接种物,分别接种到大豆酪蛋白消化琼脂平板(用于细菌培养)和沙氏葡萄糖琼脂平板(用于真菌培养)上,采用倾注平板法进行接种。然后将平板置于培养箱中培养。
5.1.5 当观察到每个培养皿上都有可见的微生物生长时,计算并记录培养悬浮液制备记录中的平均菌落形成单位(CFU)数量。
5.1.6 计算接种物的数量或适当的稀释液,使其含有10至100 CFU/毫升范围内的菌落形成单位(colony forming units)。
5.2 存储与使用
5.2.1 将浓度为10–100 CFU/ml的培养悬浮液适当稀释后冷藏保存,使用期限为一周,使用完毕后需丢弃(从制备之日起计算)。 培养基处置的标准操作规程 并按照规定的格式进行记录。5.2.2 取1毫升上述制备好的培养悬浮液作为阳性对照。 环境监测MLT 和 **生育能力测试**).
6.0 缩写词
6.1 CFU:菌落形成单位6.2 SCDA:大豆酪蛋白消化琼脂
6.3 SDA:沙氏葡萄糖琼脂(Sabouraud Dextrose Agar)
6.4 SCDB:大豆酪蛋白消化肉汤
6.5 MLT:微生物限度检测
6.6 NaCl:氯化钠
6.7 质量控制(Quality Control)
6.8 SOP:标准操作规程