1.0 目标
制定介质制备的程序。2.0 范围
本标准操作规程（SOP）适用于微生物学部门中的培养基制备工作。3.0 责任
微生物学家4.0 责任制
质量保证与质量控制部门负责人5.0 程序
5.1 微生物培养基的制备与使用方法
5.1.1 使用 脱水培养基 来自 Hi-Media。在使用前，请先检查该媒体在内部的使用情况（即是否已经过批准或符合相关标准）。5.1.2 媒质的制备方法在包装上有所说明。其中列出了每升培养基中应悬浮的粉末用量。 注射用水.
5.1.3 称取所需量的粉末，并加入所需量的新鲜收集的注射用水（WFI）。记录下各自的重量，充分混合以使粉末溶解，然后在使用前检查培养基的pH值。 灭菌按照包装上的说明对培养基进行灭菌处理。高压灭菌后，让培养基冷却至55-60°C，然后将其储存在约55 ± 5°C的温度下，或者根据要求将其倒入培养皿中。
5.1.4 该存储介质可使用7天。请保留相关记录以备查阅。 **介质制备** “使用与销毁的格式”
5.1.5 肉汤培养基
5.1.5.1 按照培养基包装上的说明称量脱水培养基的重量，并加入注射用水（WFI）。记录每种培养基的称量结果。5.1.5.2 将固体溶解在注射用水（WFI）中，如有必要，轻轻加热以获得均匀的溶液；冷却至室温后，使用0.1 M HCl或0.1 M NaOH溶液调整所需的pH值（具体pH值见相应的培养基包装说明）。
5.1.5.3 将适量的培养基分配到合适的烧瓶或试管中。用不吸水的棉塞塞住试管口，然后用铝箔纸包裹起来。
5.1.5.4 按照包装上的说明对培养基进行灭菌处理。应使用高压蒸汽灭菌法（autoclaving），温度为121°C，压力为15磅/平方英寸（15 psi），时间为20分钟，或根据具体培养基的要求进行相应时间的灭菌。
5.1.5.5 经过灭菌处理后，将培养基冷却至室温，再次使用pH试纸或pH计检测其pH值，并将其用于后续分析。
5.1.5.6 将灭菌后的肉汤培养基储存在25°C以下，直至使用。
5.1.6 显色培养基
5.1.6.1 按照培养基包装上的说明，用注射用水（WFI）称量脱水培养基的重量。记录每种培养基的称量结果。5.1.6.2 将固体溶解在注射用水（WFI）中，如有必要，轻轻加热至完全溶解；冷却至室温后，使用0.1 M盐酸或0.1 M氢氧化钠溶液调整所需的pH值（具体pH值见相应培养基包装上的说明）。
5.1.6.3 将适量的培养基分配到相应的烧瓶中。用不吸水的棉塞塞住烧瓶口，然后用铝箔包裹起来。
5.1.6.4 按照包装上的说明对培养基进行灭菌处理。应使用高压蒸汽灭菌法（autoclaving），温度为121°C，压力为15磅/平方英寸（15 psi），时间为20分钟，或根据具体培养基的要求进行相应时间的灭菌。
5.1.6.5 经过灭菌处理后，让培养基冷却至60ºC。
5.1.6.6 将熔融的培养基储存在温度维持在55-60ºC的烤箱中，直至进一步使用。
5.1.6.7 在某些情况下，例如使用硒代半胱氨酸肉汤（Selenite cysteine broth）时，不要对溶液进行高压灭菌。制备溶液后，按照培养基包装上提供的灭菌方法进行操作。之后将其冷却至室温即可使用。
5.1.6.7 对于琼脂培养基，高压灭菌后，将其冷却至约45-50°C，然后…… （用于描述向媒体泄露信息或制造新闻事件）向媒体爆料；故意制造新闻 将液体无菌地转移到无菌培养皿中，每皿加入15至20毫升的培养基。让这些培养皿凝固后，盖上盖子并倒置存放。 BOD（生化需氧量）培养箱 （温度应低于25°C。）
5.1.6.8 所有当天制备的培养基都应分配相应的批号，并将这些批号记录在培养基制备、公用设施使用及销毁的记录中。
5.2 分配批号
所有在一次高压灭菌循环中制备的培养基都应具有相应的批号，这些批号必须记录在培养基制备的相关文件中。高压灭菌培养基的批号分配方式如下：XXX/ZZZZZ
其中，XXX表示高压灭菌批次编号，每年从001开始依次递增。
ZZZZZ：制造商提供的培养基批号。
必须在制备后的2小时内对微生物培养基进行灭菌处理。
5.3 微生物培养基的储存
制备好的培养基/培养液培养基：储存温度应低于25°C。
熔融琼脂培养基：需保存在55-60°C的温度范围内。
制备好的平板：需存放在25°C以下的环境中。 BOD
5.4 培养基的检测：
5.4.1 pH值测定：从每次制备的培养基中取样（每次制备的培养基量应相同），样品需在高压灭菌后冷却至室温。使用电极测量固体培养基的pH值（在培养基固化之前），以及液体培养基的pH值。记录测量结果。如果测得的pH值不符合要求，需对同一批次的另外两个容器重新进行测量。如果两次测量的结果都在规定范围内，则该批次的培养基可用于后续测试；如果结果仍不符合要求，则该批次培养基不得使用，必须予以废弃。5.4.2 预孵育
将培养基预培养48小时。培养结束后，对培养基进行目视检查，以确认是否存在任何异常情况。 污染；杂质 如果发现明显的生长迹象（即肉眼可见的微生物生长），则应按照规定丢弃所有培养基。 《培养基处理操作规程》.5.4.3 促进生长的特性
促进生长的 根据标准操作规程（SOP），使用指示性微生物来测试选择性和非选择性培养基的特性。6.0 缩写词
标准操作规程（SOP）QA：质量保证
QC：质量控制
BOD：生化需氧量
M: 摩尔浓度
WFI：注射用水