1.0 目标
用于描述生物指示物中孢子计数方法的程序。2.0 范围
本标准操作规程（SOP）适用于生物指示物中孢子计数的测定方法。3.0 责任
微生物学家 - 质量控制部门4.0 责任制
质量控制经理5.0 程序/规程
5.1 以无菌方式转移一条试纸条。 生物指示剂 将1毫升冷却后的无菌蒸馏水加入一个无菌的20x150毫米螺旋盖试管中，并加入5颗直径为4-5毫米的无菌玻璃珠。5.2 使用中等速度，通过涡流方式将纸条的各个组成部分纤维分离成纸浆，处理时间约为1分钟。
5.3 用另外9毫升的溶剂稀释 无菌蒸馏水 再次将溶液放入涡旋器中搅拌约一分钟。这样得到的溶液是孢子条原液的1:10稀释液。在用移液器吸取该悬浮液时，要避免将纤维团吸入移液器中。
5.4 将嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）的孢子悬浮液放入95-100°C的沸水浴中加热15分钟；当温度达到95°C时（使用秒表计时），立即开始计时。
5.5 将悬浮液迅速在冰水浴（0-4°C）中冷却。
5.6 将两份样品转移至两个单独的无菌试管中；每份取1毫升的样品。
5.7 使用冷藏的无菌蒸馏水作为稀释剂，从每个样品中制备一系列十倍稀释液。稀释范围应选择为使得一个稀释系列能够产生30至300 CFU/ml之间的浓度。
5.8 从每种稀释液中转移1毫升到两个重复培养皿中，然后在每个培养皿中加入15毫升胰蛋白酶大豆琼脂（温度为40-50°C）。待其固化后使用。
5.9 将培养皿置于55-60°C的温度下培养24至48小时后进行观察。
5.10 记录每个平板上的菌落数量，并将结果填写在生物指示剂计数表中。
5.11 使用适当的稀释因子来确定平均计数。
5.12 每条孢子条上的孢子数量应不低于制造商标签上所标明菌株可见孢子数量的50%，且不超过其130%。注意：每次收到新的孢子批次/批号时，都必须重复此操作。
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6.0 缩写词
6.1 标准操作规程（Standard Operating Procedure）6.2 CFU - 菌落形成单位