1.0 目标
本方案的目的是通过科学数据提供书面证据，以确定并验证制备好的微生物悬浮液在储存一段时间后的稳定性，这些数据将用于微生物检测。
2.0 范围
本方案的目的是评估制备好的样品的保存时间（即稳定性）。 **接种物；菌种** 悬浮液（菌落形成单位/毫升），在储存15天后仍保持有效。本方案还应明确说明接种物在2-8°C温度下储存的有效性。
3.0 参考文件
在制定方案的过程中参考了以下文件。
3.2
3.3 《培养物接种物制备标准操作规程》
4.0 责任
质量保证（QA）和质量控制（QC）微生物部门在验证方案相关活动中的职责如下所述：
4.1 质量保证
方案（研究或生产流程）的审核与批准
4.2 质量控制
方案的准备、审查与执行
5.0 程序
5.1 先决条件
• 已灭菌的玻璃器皿
• 已制备好的芽孢杆菌接种液悬浮液 字幕、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肠沙门氏菌、黑曲霉、白色念珠菌、产孢梭菌和产气肠杆菌。
5.2 持留时间研究程序
5.2.1 **传代培养** 将指定微生物的保存培养物接种到10毫升大豆酪蛋白消化培养基中。
5.2.2 将厌氧菌接种到10毫升煮熟的肉培养基中，并在以下温度下进行培养。
5.2.2.1 30-35ºC代表24小时，用于需氧细菌培养。（指芽孢杆菌） 字幕；金黄色葡萄球菌；铜绿假单胞菌；大肠杆菌；肠沙门氏菌；产气肠杆菌；环境分离株（枯草芽孢杆菌）。
5.2.2.2 30-35ºC表示需在48至72小时内进行需氧细菌培养。**耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis）**)
5.2.2.3 30-35ºC表示在24-44小时内进行厌氧菌培养。产孢梭菌（Clostridium sporogenes）)
5.2.2.4 20-25ºC表示在24-48小时内进行酵母培养。白色念珠菌)
5.2.2.5 在20-25°C的温度下培养48-72小时，以培养霉菌。黑曲霉（Aspergillus niger）)
5.2.3 假设肉汤培养物的数量为109 在需检测好氧细菌的情况下，每毫升样品中的微生物数量应为0 个或更少；对于其他微生物，数量应为10 个或更少。8 在厌氧菌、酵母和霉菌的情况下，使用“微生物数量/毫升（organism/ml）”作为单位进行检测。
5.2.4 将每种培养物用0.1%蛋白胨盐水进行系列稀释，直至获得每毫升含有大约10-100个菌落形成单位（CFU）的稀释液。确保在稀释过程中每种稀释液都充分混合均匀。
5.2.5 根据使用需求配制工作稀释液。对稀释液进行标记，并将其储存在2-8°C的温度下。
5.2.6 用移液器吸取每种稀释液1.0毫升，分别加入两个无菌培养皿中（每个培养皿中加入两份样品）。
5.2.7 应采用倾注平板法进行检测。细菌培养使用大豆酪蛋白消化琼脂（Soybean casein digest agar），酵母和霉菌培养使用大豆酪蛋白消化琼脂/沙氏葡萄糖琼脂（Soybean casein digest agar / Sabouraud dextrose agar）。
5.2.8 在以下温度下进行培养（或孵育）。
5.2.8.1 30-35ºC表示在24小时内进行需氧细菌培养（培养基为Bacillus）。 字幕；金黄色葡萄球菌；铜绿假单胞菌；大肠杆菌；肠沙门氏菌；产气肠杆菌；环境分离株（枯草芽孢杆菌）。
5.2.8.2 30-35ºC表示需在48至72小时内进行需氧细菌培养。**耻垢分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis）**)
5.2.8.3 30-35ºC表示在24-44小时内进行厌氧菌培养。产孢梭菌（Clostridium sporogenes）)
5.2.8.4 20-25ºC表示在24-48小时内进行酵母培养。白色念珠菌)
5.2.8.5 在20-25°C的温度下培养48-72小时，以检测霉菌的生长情况。黑曲霉（Aspergillus niger）)
5.2.9 计算活菌/酵母菌和霉菌的数量，并计算出工作稀释液的体积，使其含有10-100 CFU（菌落形成单位）。
5.2.10 在标签上标明稀释液的浓度（单位：细胞数/毫升），标注日期，并将稀释液储存在2-8°C的温度下。
5.2.11 在初始阶段进行工作菌种的检测，并在此之后每3个月再次进行检测。rd 储存时间最长为15天。在研究期间，培养物应保存在2-8°C的温度下，直至规定的保存时间。如果测试日恰好是节假日，则应在下一个工作日进行测试。
6.0 接受标准
7.0 结论
8.0 缩写
标准操作规程（SOP）
°C - 摄氏度
CFU - 菌落形成单位
% - 百分比
ml - 毫升
附件I
计数观察
S. 不。
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微生物
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观察到的菌落计数（CFU/ml）
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初始的；开始的
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3rd 天
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7由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的翻译词典中无法找到其对应的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。 天
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10由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的含义，因此无法提供准确的翻译。请提供更多的上下文或信息，以便我能够给出正确的翻译。 天
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12由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在药学或技术领域的术语中也没有明确的对应中文翻译。如果您能提供更多的上下文或具体的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。 天
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15由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。 天
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1
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**芽孢杆菌** 字幕
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2
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金黄色葡萄球菌
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3
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铜绿假单胞菌
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4
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大肠杆菌
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5
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**肠沙门氏菌**
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6
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产气肠杆菌
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7
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产孢梭菌（Clostridium sporogenes）
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8
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白色念珠菌
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9
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黑曲霉（Aspergillus niger）
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附件二
回收率百分比
翻译结果：
S. 不。
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微生物
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回收率百分比
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初始的；开始的
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3rd 天
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7由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。 天
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10由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。 天
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12由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的翻译词典中无法找到其对应的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或明确“th”的含义，我将能够更准确地帮助您进行翻译。 天
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15由于“th”并不是一个常见的英文单词或短语，在标准的语言资源中无法找到其准确的中文翻译。如果您能提供更多的上下文或说明它的具体含义，我将很乐意帮助您进行翻译。 天
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1
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**Bacillus** 字幕
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金黄色葡萄球菌
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3
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铜绿假单胞菌
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4
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大肠杆菌
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5
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**肠沙门氏菌（Salmonella enterica）**
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6
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肠产气杆菌
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产孢梭菌（Clostridium sporogenes）
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8
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白色念珠菌
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黑曲霉（Aspergillus niger）
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